青岛大学医学院学报
青島大學醫學院學報
청도대학의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE QINGDAO UNIVERSITATIS
2010年
2期
95-97,100
,共4页
沈方臻%林明刚%肖文静%王宁宁
瀋方臻%林明剛%肖文靜%王寧寧
침방진%림명강%초문정%왕저저
基因,bcl-2%RNA干扰%质粒
基因,bcl-2%RNA榦擾%質粒
기인,bcl-2%RNA간우%질립
目的 构建针对bcl-2基因的短发卡RNA(shRNA)干扰真核质粒表达载体,转染到bcl-2基因高表达的胃癌细胞株SGC-7901中,并筛选出稳定低表达bcl-2基因的细胞株.方法 针对bcl-2基因的mRNA序列设计、合成4对寡核苷酸序列,插入质粒载体pGPH1/GFP/Neo中,经脂质体介导转染SGC-7901细胞.RT-PCR检测bcl-2基因在mRNA水平的变化, MTT 法检测bcl-2基因沉默后胃癌SGC-7901细胞的增殖情况.基因沉默效果最好的一组,经G418筛选以得到稳定表达株.结果 与对照组相比,转染成功后的细胞bcl-2基因在mRNA水平均显著下降, 细胞增殖速度明显降低(t=2.41,P<0.05);并筛选出稳定表达shRNA2质粒的阳性克隆.结论 本研究成功利用针对bcl-2基因的shRNA质粒载体筛选出稳定低表达bcl-2基因的SGC-7901细胞,为胃癌的基因治疗研究奠定了基础.
目的 構建針對bcl-2基因的短髮卡RNA(shRNA)榦擾真覈質粒錶達載體,轉染到bcl-2基因高錶達的胃癌細胞株SGC-7901中,併篩選齣穩定低錶達bcl-2基因的細胞株.方法 針對bcl-2基因的mRNA序列設計、閤成4對寡覈苷痠序列,插入質粒載體pGPH1/GFP/Neo中,經脂質體介導轉染SGC-7901細胞.RT-PCR檢測bcl-2基因在mRNA水平的變化, MTT 法檢測bcl-2基因沉默後胃癌SGC-7901細胞的增殖情況.基因沉默效果最好的一組,經G418篩選以得到穩定錶達株.結果 與對照組相比,轉染成功後的細胞bcl-2基因在mRNA水平均顯著下降, 細胞增殖速度明顯降低(t=2.41,P<0.05);併篩選齣穩定錶達shRNA2質粒的暘性剋隆.結論 本研究成功利用針對bcl-2基因的shRNA質粒載體篩選齣穩定低錶達bcl-2基因的SGC-7901細胞,為胃癌的基因治療研究奠定瞭基礎.
목적 구건침대bcl-2기인적단발잡RNA(shRNA)간우진핵질립표체재체,전염도bcl-2기인고표체적위암세포주SGC-7901중,병사선출은정저표체bcl-2기인적세포주.방법 침대bcl-2기인적mRNA서렬설계、합성4대과핵감산서렬,삽입질립재체pGPH1/GFP/Neo중,경지질체개도전염SGC-7901세포.RT-PCR검측bcl-2기인재mRNA수평적변화, MTT 법검측bcl-2기인침묵후위암SGC-7901세포적증식정황.기인침묵효과최호적일조,경G418사선이득도은정표체주.결과 여대조조상비,전염성공후적세포bcl-2기인재mRNA수평균현저하강, 세포증식속도명현강저(t=2.41,P<0.05);병사선출은정표체shRNA2질립적양성극륭.결론 본연구성공이용침대bcl-2기인적shRNA질립재체사선출은정저표체bcl-2기인적SGC-7901세포,위위암적기인치료연구전정료기출.
