畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
9期
1271-1276
,共6页
邵军军%王景锋%常惠芸%柳纪省
邵軍軍%王景鋒%常惠蕓%柳紀省
소군군%왕경봉%상혜예%류기성
口蹄疫病毒%3D蛋白%免疫%疫苗
口蹄疫病毒%3D蛋白%免疫%疫苗
구제역병독%3D단백%면역%역묘
为了研究口蹄疫病毒(FMDV)重组蛋白3D对病毒表位抗原的免疫调节功能,笔者克隆了Asia 1型FM-DV的3D蛋白基因,并实现了重组蛋白在E.coli的表达及纯化.将纯化的重组蛋白3D与重组抗原按1∶2混合,并与等体积的ISA 206佐剂混合,制备免疫原(每毫升含50 μg3D重组蛋白和100 μg重组抗原).按每只豚鼠1 mL剂量经后腿肌肉多点接种250~300 g健康豚鼠5只,免疫后28 d用相同剂量的免疫原进行加强免疫;分别于免疫后0、21、28和42 d采血检测血清中和抗体效价,并进行淋巴细胞增殖试验.于加强免疫后14 d用103的50%豚鼠感染量(GPID50)的Asia1型FMDV进行攻击,评价免疫原效力.同时,设立重组抗原/ISA 2061(每毫升含100 μg重组抗原)、Asia 1型灭活疫苗(1mL)和PBS/ISA 206(1 mL)作为对照.结果表明,3D重组蛋白能显著提高表位重组抗原的中和抗体水平和淋巴细胞的增殖水平(P<0.05),但与灭活疫苗组没有差别(P>0.05);PBS对照组未检测到中和抗体和淋巴细胞增殖.结果提示,重组蛋白3D可显著提高重组表位抗原的免疫潜能,是一种十分重要的免疫调节蛋白,对开发新型疫苗具有重要的意义.
為瞭研究口蹄疫病毒(FMDV)重組蛋白3D對病毒錶位抗原的免疫調節功能,筆者剋隆瞭Asia 1型FM-DV的3D蛋白基因,併實現瞭重組蛋白在E.coli的錶達及純化.將純化的重組蛋白3D與重組抗原按1∶2混閤,併與等體積的ISA 206佐劑混閤,製備免疫原(每毫升含50 μg3D重組蛋白和100 μg重組抗原).按每隻豚鼠1 mL劑量經後腿肌肉多點接種250~300 g健康豚鼠5隻,免疫後28 d用相同劑量的免疫原進行加彊免疫;分彆于免疫後0、21、28和42 d採血檢測血清中和抗體效價,併進行淋巴細胞增殖試驗.于加彊免疫後14 d用103的50%豚鼠感染量(GPID50)的Asia1型FMDV進行攻擊,評價免疫原效力.同時,設立重組抗原/ISA 2061(每毫升含100 μg重組抗原)、Asia 1型滅活疫苗(1mL)和PBS/ISA 206(1 mL)作為對照.結果錶明,3D重組蛋白能顯著提高錶位重組抗原的中和抗體水平和淋巴細胞的增殖水平(P<0.05),但與滅活疫苗組沒有差彆(P>0.05);PBS對照組未檢測到中和抗體和淋巴細胞增殖.結果提示,重組蛋白3D可顯著提高重組錶位抗原的免疫潛能,是一種十分重要的免疫調節蛋白,對開髮新型疫苗具有重要的意義.
위료연구구제역병독(FMDV)중조단백3D대병독표위항원적면역조절공능,필자극륭료Asia 1형FM-DV적3D단백기인,병실현료중조단백재E.coli적표체급순화.장순화적중조단백3D여중조항원안1∶2혼합,병여등체적적ISA 206좌제혼합,제비면역원(매호승함50 μg3D중조단백화100 μg중조항원).안매지돈서1 mL제량경후퇴기육다점접충250~300 g건강돈서5지,면역후28 d용상동제량적면역원진행가강면역;분별우면역후0、21、28화42 d채혈검측혈청중화항체효개,병진행림파세포증식시험.우가강면역후14 d용103적50%돈서감염량(GPID50)적Asia1형FMDV진행공격,평개면역원효력.동시,설립중조항원/ISA 2061(매호승함100 μg중조항원)、Asia 1형멸활역묘(1mL)화PBS/ISA 206(1 mL)작위대조.결과표명,3D중조단백능현저제고표위중조항원적중화항체수평화림파세포적증식수평(P<0.05),단여멸활역묘조몰유차별(P>0.05);PBS대조조미검측도중화항체화림파세포증식.결과제시,중조단백3D가현저제고중조표위항원적면역잠능,시일충십분중요적면역조절단백,대개발신형역묘구유중요적의의.