四川大学学报(自然科学版)
四川大學學報(自然科學版)
사천대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY
2001年
6期
919-923
,共5页
王小行%周建%向珑%郭砚%高小平
王小行%週建%嚮瓏%郭硯%高小平
왕소행%주건%향롱%곽연%고소평
PPAR γ配体结合域%融合基因表达%纯化%鉴定
PPAR γ配體結閤域%融閤基因錶達%純化%鑒定
PPAR γ배체결합역%융합기인표체%순화%감정
提取MCF-7乳腺癌细胞的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出hPPAR γ/LBD cDNA,并克隆于载体pGEX-1γ上,测序表明该序列与已报道序列相同,将其转入BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达GST-hPPAR γ/LBD,在不同培养温度或IPTG诱导浓度下,GST-hPPAR γ/LBD以可溶或包涵体形式存在,表达产物经谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析纯化,可被抗hPPARγ多克隆抗体特异识别,并与其天然配体发生特异性结合.
提取MCF-7乳腺癌細胞的總RNA,通過RT-PCR技術擴增齣hPPAR γ/LBD cDNA,併剋隆于載體pGEX-1γ上,測序錶明該序列與已報道序列相同,將其轉入BL21(DE3)大腸桿菌中,IPTG誘導錶達GST-hPPAR γ/LBD,在不同培養溫度或IPTG誘導濃度下,GST-hPPAR γ/LBD以可溶或包涵體形式存在,錶達產物經穀胱甘肽Sepharose 4B親和層析純化,可被抗hPPARγ多剋隆抗體特異識彆,併與其天然配體髮生特異性結閤.
제취MCF-7유선암세포적총RNA,통과RT-PCR기술확증출hPPAR γ/LBD cDNA,병극륭우재체pGEX-1γ상,측서표명해서렬여이보도서렬상동,장기전입BL21(DE3)대장간균중,IPTG유도표체GST-hPPAR γ/LBD,재불동배양온도혹IPTG유도농도하,GST-hPPAR γ/LBD이가용혹포함체형식존재,표체산물경곡광감태Sepharose 4B친화층석순화,가피항hPPARγ다극륭항체특이식별,병여기천연배체발생특이성결합.
