中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2003年
3期
180-184
,共5页
齐润姿%厉永建%安华章%于益芝%杨小妍%曹雪涛
齊潤姿%厲永建%安華章%于益芝%楊小妍%曹雪濤
제윤자%려영건%안화장%우익지%양소연%조설도
肝癌细胞%组成性活化形式的Notch1(ICN)%重组逆转录病毒载体%生长%细胞周期
肝癌細胞%組成性活化形式的Notch1(ICN)%重組逆轉錄病毒載體%生長%細胞週期
간암세포%조성성활화형식적Notch1(ICN)%중조역전록병독재체%생장%세포주기
目的:研究逆转录病毒介导的Notch1(ICN)基因转染对人肝癌细胞生长的影响,并对其作用机制进行了探讨.方法:采用磷酸钙沉淀法质粒共转染293T细胞,制备出表达组成性活化形式的Notch1(ICN)和/或绿色荧光蛋白(GFP)的逆转录病毒载体MSCV-ICN/GFP及对照逆转录病毒载体MSCV-GFP,并检测病毒滴度.用逆转录病毒感染人肝癌细胞Hep3B,观察病毒的感染效率,MTT比色法测定瞬时表达Notch1(ICN)对Hep3B人肝癌细胞生长的影响,利用流式细胞仪分析细胞周期分布的变化,Western blot方法检测细胞周期调控蛋白的变化.结果:通过质粒共转染可获得具有较高滴度的重组逆转录病毒.MTT比色法显示瞬时表达Notch1(ICN)基因可以抑制人肝癌细胞Hep3B的生长,瞬时表达Notch1(ICN)基因可使Hep3B细胞周期停滞在G0/G1期并上调细胞周期调控蛋白P53的表达水平.结论:Notch1基因可通过影响细胞周期分布和P53蛋白的表达水平而抑制人肝癌细胞生长.
目的:研究逆轉錄病毒介導的Notch1(ICN)基因轉染對人肝癌細胞生長的影響,併對其作用機製進行瞭探討.方法:採用燐痠鈣沉澱法質粒共轉染293T細胞,製備齣錶達組成性活化形式的Notch1(ICN)和/或綠色熒光蛋白(GFP)的逆轉錄病毒載體MSCV-ICN/GFP及對照逆轉錄病毒載體MSCV-GFP,併檢測病毒滴度.用逆轉錄病毒感染人肝癌細胞Hep3B,觀察病毒的感染效率,MTT比色法測定瞬時錶達Notch1(ICN)對Hep3B人肝癌細胞生長的影響,利用流式細胞儀分析細胞週期分佈的變化,Western blot方法檢測細胞週期調控蛋白的變化.結果:通過質粒共轉染可穫得具有較高滴度的重組逆轉錄病毒.MTT比色法顯示瞬時錶達Notch1(ICN)基因可以抑製人肝癌細胞Hep3B的生長,瞬時錶達Notch1(ICN)基因可使Hep3B細胞週期停滯在G0/G1期併上調細胞週期調控蛋白P53的錶達水平.結論:Notch1基因可通過影響細胞週期分佈和P53蛋白的錶達水平而抑製人肝癌細胞生長.
목적:연구역전록병독개도적Notch1(ICN)기인전염대인간암세포생장적영향,병대기작용궤제진행료탐토.방법:채용린산개침정법질립공전염293T세포,제비출표체조성성활화형식적Notch1(ICN)화/혹록색형광단백(GFP)적역전록병독재체MSCV-ICN/GFP급대조역전록병독재체MSCV-GFP,병검측병독적도.용역전록병독감염인간암세포Hep3B,관찰병독적감염효솔,MTT비색법측정순시표체Notch1(ICN)대Hep3B인간암세포생장적영향,이용류식세포의분석세포주기분포적변화,Western blot방법검측세포주기조공단백적변화.결과:통과질립공전염가획득구유교고적도적중조역전록병독.MTT비색법현시순시표체Notch1(ICN)기인가이억제인간암세포Hep3B적생장,순시표체Notch1(ICN)기인가사Hep3B세포주기정체재G0/G1기병상조세포주기조공단백P53적표체수평.결론:Notch1기인가통과영향세포주기분포화P53단백적표체수평이억제인간암세포생장.
