解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2004年
6期
612-616
,共5页
胡宝洋%刘坤%万瑾%龚宏华%佘振珏%肖虹蕾%周国民
鬍寶洋%劉坤%萬瑾%龔宏華%佘振玨%肖虹蕾%週國民
호보양%류곤%만근%공굉화%사진각%초홍뢰%주국민
雌激素%神经生长因子%视网膜%血管内皮细胞%管腔形成%恒河猴
雌激素%神經生長因子%視網膜%血管內皮細胞%管腔形成%恆河猴
자격소%신경생장인자%시망막%혈관내피세포%관강형성%항하후
目的研究神经生长因子(NGF)信号系统在雌激素调控视网膜血管内皮细胞中的作用.方法选用恒河猴视网膜-脉络膜血管内皮细胞系RF/6A,RT-PCR检测雌激素受体(estrogen receptor,ER)、NGF及其受体在视网膜血管内皮细胞中的表达.分别观察雌二醇(estradiol,E2)、NGF及VEGF、EGF、BDNF等对血管内皮细胞活力(MTT法)的作用.用流式细胞术-细胞周期法检测E2、NCF及E2与K252a共同处理组的凋亡率.NGF抗体和选择性TrkA拮抗剂K252a研究对上述作用的阻断效应.同样的分组进行细胞划痕修复实验.96孔板AngioMatrix胶上观察E2及NGF对RF/6A内皮细胞管腔形成能力的影响. 结果RF/6A在细胞外基质胶上可形成管腔样结构.RT-PCR检测到ER-α、NGF及NGF受体TrkA的mRNA.1nmol/L~100nmol/L E2可以剂量依赖性的增强细胞活力及单层细胞的划痕修复能力,其增强作用可部分被NGF抗体及100nmol/L的K252a选择性阻断.凋亡率检测显示各组凋亡率相近.E2可促进RF/6A形成管腔,但不能被NGF抗体、TrkA阻断.结论除VEGF外,E2还可通过NGF信号系统对视网膜血管内皮细胞活力、划痕修复起促进作用.但结果提示,阻断NGF信号系统不影响E2促RF/6A形成管腔的作用.
目的研究神經生長因子(NGF)信號繫統在雌激素調控視網膜血管內皮細胞中的作用.方法選用恆河猴視網膜-脈絡膜血管內皮細胞繫RF/6A,RT-PCR檢測雌激素受體(estrogen receptor,ER)、NGF及其受體在視網膜血管內皮細胞中的錶達.分彆觀察雌二醇(estradiol,E2)、NGF及VEGF、EGF、BDNF等對血管內皮細胞活力(MTT法)的作用.用流式細胞術-細胞週期法檢測E2、NCF及E2與K252a共同處理組的凋亡率.NGF抗體和選擇性TrkA拮抗劑K252a研究對上述作用的阻斷效應.同樣的分組進行細胞劃痕脩複實驗.96孔闆AngioMatrix膠上觀察E2及NGF對RF/6A內皮細胞管腔形成能力的影響. 結果RF/6A在細胞外基質膠上可形成管腔樣結構.RT-PCR檢測到ER-α、NGF及NGF受體TrkA的mRNA.1nmol/L~100nmol/L E2可以劑量依賴性的增彊細胞活力及單層細胞的劃痕脩複能力,其增彊作用可部分被NGF抗體及100nmol/L的K252a選擇性阻斷.凋亡率檢測顯示各組凋亡率相近.E2可促進RF/6A形成管腔,但不能被NGF抗體、TrkA阻斷.結論除VEGF外,E2還可通過NGF信號繫統對視網膜血管內皮細胞活力、劃痕脩複起促進作用.但結果提示,阻斷NGF信號繫統不影響E2促RF/6A形成管腔的作用.
목적연구신경생장인자(NGF)신호계통재자격소조공시망막혈관내피세포중적작용.방법선용항하후시망막-맥락막혈관내피세포계RF/6A,RT-PCR검측자격소수체(estrogen receptor,ER)、NGF급기수체재시망막혈관내피세포중적표체.분별관찰자이순(estradiol,E2)、NGF급VEGF、EGF、BDNF등대혈관내피세포활력(MTT법)적작용.용류식세포술-세포주기법검측E2、NCF급E2여K252a공동처리조적조망솔.NGF항체화선택성TrkA길항제K252a연구대상술작용적조단효응.동양적분조진행세포화흔수복실험.96공판AngioMatrix효상관찰E2급NGF대RF/6A내피세포관강형성능력적영향. 결과RF/6A재세포외기질효상가형성관강양결구.RT-PCR검측도ER-α、NGF급NGF수체TrkA적mRNA.1nmol/L~100nmol/L E2가이제량의뢰성적증강세포활력급단층세포적화흔수복능력,기증강작용가부분피NGF항체급100nmol/L적K252a선택성조단.조망솔검측현시각조조망솔상근.E2가촉진RF/6A형성관강,단불능피NGF항체、TrkA조단.결론제VEGF외,E2환가통과NGF신호계통대시망막혈관내피세포활력、화흔수복기촉진작용.단결과제시,조단NGF신호계통불영향E2촉RF/6A형성관강적작용.