化学反应工程与工艺
化學反應工程與工藝
화학반응공정여공예
CHEMICAL REACTION ENGINEERING AND TECHNOLOGY
2007年
4期
289-295
,共7页
张海龙%乔昕%姚红娟%郑春杨%苏志国
張海龍%喬昕%姚紅娟%鄭春楊%囌誌國
장해룡%교흔%요홍연%정춘양%소지국
亲和吸附介质%琼脂糖%配基密度%谷胱甘肽
親和吸附介質%瓊脂糖%配基密度%穀胱甘肽
친화흡부개질%경지당%배기밀도%곡광감태
以谷胱甘肽为配基,琼脂糖微球为骨架,探索将谷胱甘肽通过共价键偶联到琼脂糖微球骨架上,制备可以分离谷胱甘肽S转移酶(Glutathione S-transferase, GST)及以其为标签的融合蛋白的亲和吸附介质.采用正交实验方法考察了谷胱甘肽加入量、偶联缓冲液的pH值和反应温度对亲和介质配基密度的影响.结果发现,该反应过程中的pH值对配基密度影响最大,其次为谷胱甘肽的加入量.用所制备的亲和吸附介质纯化GST(大鼠肝脏谷胱甘肽S转移酶),发现GST的吸附量随配基密度增加而增加,但GST活性却随配基密度的增加而下降,较好的干胶配基密度为260 μmol/g.大鼠肝匀浆液经过离子交换和亲和层析两个步骤,获得了电泳纯的GST,比活力为12.08 U/mg,总活性回收率为40%以上.
以穀胱甘肽為配基,瓊脂糖微毬為骨架,探索將穀胱甘肽通過共價鍵偶聯到瓊脂糖微毬骨架上,製備可以分離穀胱甘肽S轉移酶(Glutathione S-transferase, GST)及以其為標籤的融閤蛋白的親和吸附介質.採用正交實驗方法攷察瞭穀胱甘肽加入量、偶聯緩遲液的pH值和反應溫度對親和介質配基密度的影響.結果髮現,該反應過程中的pH值對配基密度影響最大,其次為穀胱甘肽的加入量.用所製備的親和吸附介質純化GST(大鼠肝髒穀胱甘肽S轉移酶),髮現GST的吸附量隨配基密度增加而增加,但GST活性卻隨配基密度的增加而下降,較好的榦膠配基密度為260 μmol/g.大鼠肝勻漿液經過離子交換和親和層析兩箇步驟,穫得瞭電泳純的GST,比活力為12.08 U/mg,總活性迴收率為40%以上.
이곡광감태위배기,경지당미구위골가,탐색장곡광감태통과공개건우련도경지당미구골가상,제비가이분리곡광감태S전이매(Glutathione S-transferase, GST)급이기위표첨적융합단백적친화흡부개질.채용정교실험방법고찰료곡광감태가입량、우련완충액적pH치화반응온도대친화개질배기밀도적영향.결과발현,해반응과정중적pH치대배기밀도영향최대,기차위곡광감태적가입량.용소제비적친화흡부개질순화GST(대서간장곡광감태S전이매),발현GST적흡부량수배기밀도증가이증가,단GST활성각수배기밀도적증가이하강,교호적간효배기밀도위260 μmol/g.대서간균장액경과리자교환화친화층석량개보취,획득료전영순적GST,비활력위12.08 U/mg,총활성회수솔위40%이상.
