四川医学
四川醫學
사천의학
SICHUAN MEDICAL JOURNAL
2008年
5期
503-505
,共3页
刀筱芳%何进宇%伍学英%龚玉来%高利民%徐亚欧%李宁%袁忠
刀篠芳%何進宇%伍學英%龔玉來%高利民%徐亞歐%李寧%袁忠
도소방%하진우%오학영%공옥래%고이민%서아구%리저%원충
5-羟色胺2c受体%TaqMan探针%real-time PCR
5-羥色胺2c受體%TaqMan探針%real-time PCR
5-간색알2c수체%TaqMan탐침%real-time PCR
目的 建立5-羟色胺2c受体(5-HTR2c)基因mRNA表达水平的TaqMan real-time PCR检测方法.方法 以β-actin为内参基因,根据GenBank中人5-HTR2c及β-actin基因序列,分别设计了2套特异性引物和TaqMan探针,接着对反应的退火温度、引物浓度、探针浓度、Mg2+浓度进行优化,然后以优化的条件建立相对定量标准曲线,并对该方法的稳定性进行了分析.结果 5-HTR2c及β-actin基因的real-time PCR扩增效率分别为99.9%和100.0%;相对定量标准曲线的CT值线性范围分别为12.2～35.1和11.5～31.5,相关系数分别为0.999及1.000;批内及批间变异系数<8.0%.结论 本研究所建立的针对5.HTR2c mRNA表达水平的Taqman real-time PCR检测方法具有扩增效率高、稳定性好等特点,为进一步探索5-HTR2c的功能及其mRNA表达水平的变化和各种疾病发生、发展的相关性提供了有用的方法学基础.
目的 建立5-羥色胺2c受體(5-HTR2c)基因mRNA錶達水平的TaqMan real-time PCR檢測方法.方法 以β-actin為內參基因,根據GenBank中人5-HTR2c及β-actin基因序列,分彆設計瞭2套特異性引物和TaqMan探針,接著對反應的退火溫度、引物濃度、探針濃度、Mg2+濃度進行優化,然後以優化的條件建立相對定量標準麯線,併對該方法的穩定性進行瞭分析.結果 5-HTR2c及β-actin基因的real-time PCR擴增效率分彆為99.9%和100.0%;相對定量標準麯線的CT值線性範圍分彆為12.2～35.1和11.5～31.5,相關繫數分彆為0.999及1.000;批內及批間變異繫數<8.0%.結論 本研究所建立的針對5.HTR2c mRNA錶達水平的Taqman real-time PCR檢測方法具有擴增效率高、穩定性好等特點,為進一步探索5-HTR2c的功能及其mRNA錶達水平的變化和各種疾病髮生、髮展的相關性提供瞭有用的方法學基礎.
목적 건립5-간색알2c수체(5-HTR2c)기인mRNA표체수평적TaqMan real-time PCR검측방법.방법 이β-actin위내삼기인,근거GenBank중인5-HTR2c급β-actin기인서렬,분별설계료2투특이성인물화TaqMan탐침,접착대반응적퇴화온도、인물농도、탐침농도、Mg2+농도진행우화,연후이우화적조건건립상대정량표준곡선,병대해방법적은정성진행료분석.결과 5-HTR2c급β-actin기인적real-time PCR확증효솔분별위99.9%화100.0%;상대정량표준곡선적CT치선성범위분별위12.2～35.1화11.5～31.5,상관계수분별위0.999급1.000;비내급비간변이계수<8.0%.결론 본연구소건립적침대5.HTR2c mRNA표체수평적Taqman real-time PCR검측방법구유확증효솔고、은정성호등특점,위진일보탐색5-HTR2c적공능급기mRNA표체수평적변화화각충질병발생、발전적상관성제공료유용적방법학기출.
