基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
6期
611-617
,共7页
严玉霞%蒋建伟%黄志宏%林春兰%张小鹰%吴风云
嚴玉霞%蔣建偉%黃誌宏%林春蘭%張小鷹%吳風雲
엄옥하%장건위%황지굉%림춘란%장소응%오풍운
蛋白激酶Cα%RNA干扰%小干扰RNA%肺癌%A549
蛋白激酶Cα%RNA榦擾%小榦擾RNA%肺癌%A549
단백격매Cα%RNA간우%소간우RNA%폐암%A549
目的 探讨人蛋白激酶Cα(PKCα)小干扰RNA(siRNA)对肺癌A549细胞生长增殖及凋亡的影响.方法 设计并化学合成6条PKCα siRNAs,转染A549细胞,通过改良MTY法及RT-PCR筛选;对3条效果较好的PKCαsiRNAs,进一步采用克隆形成抑制实验、Hoechst 33258染色、PI单染和Annexin V/PI双染以及Western blot检测.结果 6条PKCa siRNAs均显著下调了PKCα mRNA水平;除No.5 siRNA外,其他5条siRNA均显著地抑制了A549细胞增殖(P<0.05).3条效果较好的PKCα siRNAs转染组PKCα蛋白的表达显著下调,克隆形成抑制率、亚二倍体百分率和早期凋亡细胞比例均显著高于对照组(P<0.05),并出现了核固缩、边聚和裂解等凋亡形态学变化.结论 本实验发现3条能显著抑制A549细胞增殖并诱导其凋亡的PKCα siRNAs.
目的 探討人蛋白激酶Cα(PKCα)小榦擾RNA(siRNA)對肺癌A549細胞生長增殖及凋亡的影響.方法 設計併化學閤成6條PKCα siRNAs,轉染A549細胞,通過改良MTY法及RT-PCR篩選;對3條效果較好的PKCαsiRNAs,進一步採用剋隆形成抑製實驗、Hoechst 33258染色、PI單染和Annexin V/PI雙染以及Western blot檢測.結果 6條PKCa siRNAs均顯著下調瞭PKCα mRNA水平;除No.5 siRNA外,其他5條siRNA均顯著地抑製瞭A549細胞增殖(P<0.05).3條效果較好的PKCα siRNAs轉染組PKCα蛋白的錶達顯著下調,剋隆形成抑製率、亞二倍體百分率和早期凋亡細胞比例均顯著高于對照組(P<0.05),併齣現瞭覈固縮、邊聚和裂解等凋亡形態學變化.結論 本實驗髮現3條能顯著抑製A549細胞增殖併誘導其凋亡的PKCα siRNAs.
목적 탐토인단백격매Cα(PKCα)소간우RNA(siRNA)대폐암A549세포생장증식급조망적영향.방법 설계병화학합성6조PKCα siRNAs,전염A549세포,통과개량MTY법급RT-PCR사선;대3조효과교호적PKCαsiRNAs,진일보채용극륭형성억제실험、Hoechst 33258염색、PI단염화Annexin V/PI쌍염이급Western blot검측.결과 6조PKCa siRNAs균현저하조료PKCα mRNA수평;제No.5 siRNA외,기타5조siRNA균현저지억제료A549세포증식(P<0.05).3조효과교호적PKCα siRNAs전염조PKCα단백적표체현저하조,극륭형성억제솔、아이배체백분솔화조기조망세포비례균현저고우대조조(P<0.05),병출현료핵고축、변취화렬해등조망형태학변화.결론 본실험발현3조능현저억제A549세포증식병유도기조망적PKCα siRNAs.
