重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2010年
21期
2889-2891
,共3页
杨海波%廖春丽%朱涛%王莲哲%陈兰英
楊海波%廖春麗%硃濤%王蓮哲%陳蘭英
양해파%료춘려%주도%왕련철%진란영
血红蛋白%原核表达%纯化
血紅蛋白%原覈錶達%純化
혈홍단백%원핵표체%순화
目的 利用大肠杆菌表达载体,表达血红蛋白(Hb)基因,并进行纯化及鉴定.方法 将原核表达载体 pHE 2-Hb 转化入E.Coli JM109,经 IPTG 诱导表达;应用阴离子交换层析、阳离子交换层析分级纯化目的 蛋白,用Western blot鉴定纯化出的目的蛋白.结果 SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量约为67 kD,与理论值相一致;应用阴离子交换层析、阳离子交换层析分级纯化目的 蛋白,Western blot检测表明得到纯度较高的目的蛋白.结论 利用大肠杆菌表达系统,获得了较高纯度的目的蛋白,为进一步研究Hb的生物传氧机制研究和以Hb为基础载氧药物的研究提供重要基础和研究依据,并将为血液替代品和相关疾病的治疗研究奠定研究基础.
目的 利用大腸桿菌錶達載體,錶達血紅蛋白(Hb)基因,併進行純化及鑒定.方法 將原覈錶達載體 pHE 2-Hb 轉化入E.Coli JM109,經 IPTG 誘導錶達;應用陰離子交換層析、暘離子交換層析分級純化目的 蛋白,用Western blot鑒定純化齣的目的蛋白.結果 SDS-PAGE分析錶明,錶達產物的相對分子質量約為67 kD,與理論值相一緻;應用陰離子交換層析、暘離子交換層析分級純化目的 蛋白,Western blot檢測錶明得到純度較高的目的蛋白.結論 利用大腸桿菌錶達繫統,穫得瞭較高純度的目的蛋白,為進一步研究Hb的生物傳氧機製研究和以Hb為基礎載氧藥物的研究提供重要基礎和研究依據,併將為血液替代品和相關疾病的治療研究奠定研究基礎.
목적 이용대장간균표체재체,표체혈홍단백(Hb)기인,병진행순화급감정.방법 장원핵표체재체 pHE 2-Hb 전화입E.Coli JM109,경 IPTG 유도표체;응용음리자교환층석、양리자교환층석분급순화목적 단백,용Western blot감정순화출적목적단백.결과 SDS-PAGE분석표명,표체산물적상대분자질량약위67 kD,여이론치상일치;응용음리자교환층석、양리자교환층석분급순화목적 단백,Western blot검측표명득도순도교고적목적단백.결론 이용대장간균표체계통,획득료교고순도적목적단백,위진일보연구Hb적생물전양궤제연구화이Hb위기출재양약물적연구제공중요기출화연구의거,병장위혈액체대품화상관질병적치료연구전정연구기출.
