中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2011年
5期
32-36,后插3
,共6页
梁春联%朱华%黄澜%许艳峰%邓巍%马春梅%刘颖%秦川
樑春聯%硃華%黃瀾%許豔峰%鄧巍%馬春梅%劉穎%秦川
량춘련%주화%황란%허염봉%산외%마춘매%류영%진천
阿尔茨海默病%转基因小鼠%microRNA%Reticulon 4
阿爾茨海默病%轉基因小鼠%microRNA%Reticulon 4
아이자해묵병%전기인소서%microRNA%Reticulon 4
目的 探讨mir-153在阿尔茨海默病发病机制中的作用.方法 通过microRNA芯片及Real-timePCR检测APPswe/PSAE9双转基因小鼠脑内mir-153的表达;构建高表达mir-153的稳转细胞系,通过western-blot检测稳转细胞系内RTN4的蛋白表达;构建野生型及突变型RTN4的3'UTR荧光素酶报告载体,分别将其与mir-153表达载体或microRNA阴性对照载体共转染入293T细胞内,检测海肾荧光素酶的相对活性以验证mir-153对RTN4 mRNA的作用靶点.结果 microRNA芯片及Real-time PCR检测均证实3月龄APP8we/PS△E9双转基因小鼠脑内mir-153的表达较同龄野生对照显著降低;在高表达mir-153的稳转细胞系内RTN4的蛋白水平明显降低;共转染野生型RTN4的3'UTR/mir-153表达载体可使海肾荧光素酶相对活性较共转染野生型RTN4的3'UTR/miRNA阴性对照质粒组显著降低(P＜0.05),而共转染突变型RTN4的3'UTR/mir-153表达载体组则较之无明显差异.结论 在3月龄APPswe/PS△E9双转基因小鼠脑内存在mir-153的异常表达;mir-153可调控RTN4的蛋白表达;mir-153对RTN4的表达调控是通过结合RTN4 3'UTR 839-845碱基处的作用位点而实现的.
目的 探討mir-153在阿爾茨海默病髮病機製中的作用.方法 通過microRNA芯片及Real-timePCR檢測APPswe/PSAE9雙轉基因小鼠腦內mir-153的錶達;構建高錶達mir-153的穩轉細胞繫,通過western-blot檢測穩轉細胞繫內RTN4的蛋白錶達;構建野生型及突變型RTN4的3'UTR熒光素酶報告載體,分彆將其與mir-153錶達載體或microRNA陰性對照載體共轉染入293T細胞內,檢測海腎熒光素酶的相對活性以驗證mir-153對RTN4 mRNA的作用靶點.結果 microRNA芯片及Real-time PCR檢測均證實3月齡APP8we/PS△E9雙轉基因小鼠腦內mir-153的錶達較同齡野生對照顯著降低;在高錶達mir-153的穩轉細胞繫內RTN4的蛋白水平明顯降低;共轉染野生型RTN4的3'UTR/mir-153錶達載體可使海腎熒光素酶相對活性較共轉染野生型RTN4的3'UTR/miRNA陰性對照質粒組顯著降低(P＜0.05),而共轉染突變型RTN4的3'UTR/mir-153錶達載體組則較之無明顯差異.結論 在3月齡APPswe/PS△E9雙轉基因小鼠腦內存在mir-153的異常錶達;mir-153可調控RTN4的蛋白錶達;mir-153對RTN4的錶達調控是通過結閤RTN4 3'UTR 839-845堿基處的作用位點而實現的.
목적 탐토mir-153재아이자해묵병발병궤제중적작용.방법 통과microRNA심편급Real-timePCR검측APPswe/PSAE9쌍전기인소서뇌내mir-153적표체;구건고표체mir-153적은전세포계,통과western-blot검측은전세포계내RTN4적단백표체;구건야생형급돌변형RTN4적3'UTR형광소매보고재체,분별장기여mir-153표체재체혹microRNA음성대조재체공전염입293T세포내,검측해신형광소매적상대활성이험증mir-153대RTN4 mRNA적작용파점.결과 microRNA심편급Real-time PCR검측균증실3월령APP8we/PS△E9쌍전기인소서뇌내mir-153적표체교동령야생대조현저강저;재고표체mir-153적은전세포계내RTN4적단백수평명현강저;공전염야생형RTN4적3'UTR/mir-153표체재체가사해신형광소매상대활성교공전염야생형RTN4적3'UTR/miRNA음성대조질립조현저강저(P＜0.05),이공전염돌변형RTN4적3'UTR/mir-153표체재체조칙교지무명현차이.결론 재3월령APPswe/PS△E9쌍전기인소서뇌내존재mir-153적이상표체;mir-153가조공RTN4적단백표체;mir-153대RTN4적표체조공시통과결합RTN4 3'UTR 839-845감기처적작용위점이실현적.
