基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2011年
7期
793-798
,共6页
肖军%尹若峰%梁锦前%史占军%吴志宏%邱贵兴
肖軍%尹若峰%樑錦前%史佔軍%吳誌宏%邱貴興
초군%윤약봉%량금전%사점군%오지굉%구귀흥
双向电泳%等电聚焦%软骨
雙嚮電泳%等電聚焦%軟骨
쌍향전영%등전취초%연골
目的 探索可兼顾双向电泳凝胶图像质量和结果保真性的软骨蛋白提取方案.方法 取股骨髁软骨(n=17).分别用软骨组织直接提取总蛋白(软骨组织组)、软骨组织提取总蛋白后CPC处理(软骨+CPC组)、直接分离软骨细胞提取总蛋白(直接软骨细胞组)或培养软骨细胞提取总蛋白(培养软骨细胞组)同步进行2-DE,对比不同方案产生凝胶图像质量和结果保真性的差异.结果 软骨组织组不能形成等电聚焦.软骨+CPC组可形成等电聚焦,但蛋白点数量偏少.直接软骨细胞组可获得与培养软骨细胞组媲美的高质量等电聚焦和凝胶图像,且在高分子量和偏碱区域分离出培养软骨细胞组缺如的部分蛋白点,质谱结果显示这些蛋白分别为Ⅵ型胶原、TGF-β2和annexin等骨关节炎病因学相关蛋白.结论 从软骨组织直接提取软骨细胞用于2-DE的方案在解决等电聚焦难题的同时,还避免了细胞培养对实验结果保真性的影响,是软骨相关疾病样本的2-DE研究优化处理方案.
目的 探索可兼顧雙嚮電泳凝膠圖像質量和結果保真性的軟骨蛋白提取方案.方法 取股骨髁軟骨(n=17).分彆用軟骨組織直接提取總蛋白(軟骨組織組)、軟骨組織提取總蛋白後CPC處理(軟骨+CPC組)、直接分離軟骨細胞提取總蛋白(直接軟骨細胞組)或培養軟骨細胞提取總蛋白(培養軟骨細胞組)同步進行2-DE,對比不同方案產生凝膠圖像質量和結果保真性的差異.結果 軟骨組織組不能形成等電聚焦.軟骨+CPC組可形成等電聚焦,但蛋白點數量偏少.直接軟骨細胞組可穫得與培養軟骨細胞組媲美的高質量等電聚焦和凝膠圖像,且在高分子量和偏堿區域分離齣培養軟骨細胞組缺如的部分蛋白點,質譜結果顯示這些蛋白分彆為Ⅵ型膠原、TGF-β2和annexin等骨關節炎病因學相關蛋白.結論 從軟骨組織直接提取軟骨細胞用于2-DE的方案在解決等電聚焦難題的同時,還避免瞭細胞培養對實驗結果保真性的影響,是軟骨相關疾病樣本的2-DE研究優化處理方案.
목적 탐색가겸고쌍향전영응효도상질량화결과보진성적연골단백제취방안.방법 취고골과연골(n=17).분별용연골조직직접제취총단백(연골조직조)、연골조직제취총단백후CPC처리(연골+CPC조)、직접분리연골세포제취총단백(직접연골세포조)혹배양연골세포제취총단백(배양연골세포조)동보진행2-DE,대비불동방안산생응효도상질량화결과보진성적차이.결과 연골조직조불능형성등전취초.연골+CPC조가형성등전취초,단단백점수량편소.직접연골세포조가획득여배양연골세포조비미적고질량등전취초화응효도상,차재고분자량화편감구역분리출배양연골세포조결여적부분단백점,질보결과현시저사단백분별위Ⅵ형효원、TGF-β2화annexin등골관절염병인학상관단백.결론 종연골조직직접제취연골세포용우2-DE적방안재해결등전취초난제적동시,환피면료세포배양대실험결과보진성적영향,시연골상관질병양본적2-DE연구우화처리방안.
