中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
12期
2302-2306
,共5页
李素娟%李剑敏%汪洋%王万铁%邱晓晓%许益笑%金可可
李素娟%李劍敏%汪洋%王萬鐵%邱曉曉%許益笑%金可可
리소연%리검민%왕양%왕만철%구효효%허익소%금가가
氧化性应激%P53%血糖波动%细胞凋亡%肾小管上皮细胞
氧化性應激%P53%血糖波動%細胞凋亡%腎小管上皮細胞
양화성응격%P53%혈당파동%세포조망%신소관상피세포
目的:探讨波动性高糖引起的肾小管上皮细胞凋亡的机制.方法:体外培养人肾小管上皮细胞 (HK-2),给予稳定高糖或波动高糖干预,并使用抗氧化剂和P53特异性抑制剂验证氧化应激和P53在波动高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用;此外,SD大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病稳定高血糖组(B)和糖尿病波动高血糖组(C).采用链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg腹腔注射诱发糖尿病,血糖波动组每天定时腹腔注射速效胰岛素,并错时给予葡萄糖,造成一天中血糖浓度大幅波动模型.采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组化法和Western blotting检测NADPH氧化酶4(Nox4)和P53蛋白表达,流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测肾脏细胞凋亡.结果:(1)与稳定高糖比较,波动高糖引起更加明显的HK-2细胞凋亡,P53蛋白表达明显上调,同时培养上清液中MDA含量增加和SOD活性下降,抗氧化剂和P53抑制剂可明显抑制磷酸化P53蛋白表达和细胞凋亡.(2)在体动物实验制模12周后,与B组比较,C组肾组织Nox4表达明显增加,肾小管磷酸化P53蛋白表达上调,细胞凋亡数增加.结论:氧化应激和P53参与波动性高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡.
目的:探討波動性高糖引起的腎小管上皮細胞凋亡的機製.方法:體外培養人腎小管上皮細胞 (HK-2),給予穩定高糖或波動高糖榦預,併使用抗氧化劑和P53特異性抑製劑驗證氧化應激和P53在波動高糖誘導的腎小管上皮細胞凋亡中的作用;此外,SD大鼠隨機分為正常對照組(A)、糖尿病穩定高血糖組(B)和糖尿病波動高血糖組(C).採用鏈脲佐菌素(STZ)65 mg/kg腹腔註射誘髮糖尿病,血糖波動組每天定時腹腔註射速效胰島素,併錯時給予葡萄糖,造成一天中血糖濃度大幅波動模型.採用比色法檢測超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫組化法和Western blotting檢測NADPH氧化酶4(Nox4)和P53蛋白錶達,流式細胞術和原位缺口末耑標記法(TUNEL)檢測腎髒細胞凋亡.結果:(1)與穩定高糖比較,波動高糖引起更加明顯的HK-2細胞凋亡,P53蛋白錶達明顯上調,同時培養上清液中MDA含量增加和SOD活性下降,抗氧化劑和P53抑製劑可明顯抑製燐痠化P53蛋白錶達和細胞凋亡.(2)在體動物實驗製模12週後,與B組比較,C組腎組織Nox4錶達明顯增加,腎小管燐痠化P53蛋白錶達上調,細胞凋亡數增加.結論:氧化應激和P53參與波動性高糖誘導的腎小管上皮細胞凋亡.
목적:탐토파동성고당인기적신소관상피세포조망적궤제.방법:체외배양인신소관상피세포 (HK-2),급여은정고당혹파동고당간예,병사용항양화제화P53특이성억제제험증양화응격화P53재파동고당유도적신소관상피세포조망중적작용;차외,SD대서수궤분위정상대조조(A)、당뇨병은정고혈당조(B)화당뇨병파동고혈당조(C).채용련뇨좌균소(STZ)65 mg/kg복강주사유발당뇨병,혈당파동조매천정시복강주사속효이도소,병착시급여포도당,조성일천중혈당농도대폭파동모형.채용비색법검측초양화물기화매(SOD)활성화병이철(MDA)함량,면역조화법화Western blotting검측NADPH양화매4(Nox4)화P53단백표체,류식세포술화원위결구말단표기법(TUNEL)검측신장세포조망.결과:(1)여은정고당비교,파동고당인기경가명현적HK-2세포조망,P53단백표체명현상조,동시배양상청액중MDA함량증가화SOD활성하강,항양화제화P53억제제가명현억제린산화P53단백표체화세포조망.(2)재체동물실험제모12주후,여B조비교,C조신조직Nox4표체명현증가,신소관린산화P53단백표체상조,세포조망수증가.결론:양화응격화P53삼여파동성고당유도적신소관상피세포조망.
