基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
1期
31-35
,共5页
宋衍秋%赵莉莉%毛用敏%赵鸿铭%徐美林%崔让庄
宋衍鞦%趙莉莉%毛用敏%趙鴻銘%徐美林%崔讓莊
송연추%조리리%모용민%조홍명%서미림%최양장
B型利钠肽%腺病毒%慢性心力衰竭%基因治疗
B型利鈉肽%腺病毒%慢性心力衰竭%基因治療
B형리납태%선병독%만성심력쇠갈%기인치료
目的 构建重组腺病毒Ad-hBNP,观察其在CHF大鼠体内的分布与表达,为腺病毒介导BNP治疗慢性心力衰竭奠定实验基础.方法RT-PCR法从人心肌组织获得hBNP片段,应用AdEasy腺病毒载体系统,构建Ad-hBNP;CHF成模大鼠24只,随机分为4组,18只单次腹腔注射Ad-hBNP后,均分为1、4和7d组；余不予Ad-hBNP,为0点组.实验动物于相应时间处死,ELISA检测血清hBNP水平,免疫组化检测各脏器hBNP表达,RT-PCR检测各组织hBNP mRNA表达.结果成功构建用于实验性基因治疗的Ad-hBNP,纯化后滴度达到4.4×1012VP/mL.透射电镜观察Ad-hBNP呈多面体结构,颗粒直径在90 nm左右.单次腹腔注射Ad-hBNP,CHF大鼠心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏及小肠均检测到hBNP表达,外源hBNP在CHF大鼠体内的表达至少可持续7天.结论腺病毒介导的外源hBNP基因可在CHF大鼠多脏器中得到有效表达,其生物学效应时间显著长于BNP的生物半衰期.
目的 構建重組腺病毒Ad-hBNP,觀察其在CHF大鼠體內的分佈與錶達,為腺病毒介導BNP治療慢性心力衰竭奠定實驗基礎.方法RT-PCR法從人心肌組織穫得hBNP片段,應用AdEasy腺病毒載體繫統,構建Ad-hBNP;CHF成模大鼠24隻,隨機分為4組,18隻單次腹腔註射Ad-hBNP後,均分為1、4和7d組；餘不予Ad-hBNP,為0點組.實驗動物于相應時間處死,ELISA檢測血清hBNP水平,免疫組化檢測各髒器hBNP錶達,RT-PCR檢測各組織hBNP mRNA錶達.結果成功構建用于實驗性基因治療的Ad-hBNP,純化後滴度達到4.4×1012VP/mL.透射電鏡觀察Ad-hBNP呈多麵體結構,顆粒直徑在90 nm左右.單次腹腔註射Ad-hBNP,CHF大鼠心髒、肝髒、肺髒、腎髒、脾髒及小腸均檢測到hBNP錶達,外源hBNP在CHF大鼠體內的錶達至少可持續7天.結論腺病毒介導的外源hBNP基因可在CHF大鼠多髒器中得到有效錶達,其生物學效應時間顯著長于BNP的生物半衰期.
목적 구건중조선병독Ad-hBNP,관찰기재CHF대서체내적분포여표체,위선병독개도BNP치료만성심력쇠갈전정실험기출.방법RT-PCR법종인심기조직획득hBNP편단,응용AdEasy선병독재체계통,구건Ad-hBNP;CHF성모대서24지,수궤분위4조,18지단차복강주사Ad-hBNP후,균분위1、4화7d조；여불여Ad-hBNP,위0점조.실험동물우상응시간처사,ELISA검측혈청hBNP수평,면역조화검측각장기hBNP표체,RT-PCR검측각조직hBNP mRNA표체.결과성공구건용우실험성기인치료적Ad-hBNP,순화후적도체도4.4×1012VP/mL.투사전경관찰Ad-hBNP정다면체결구,과립직경재90 nm좌우.단차복강주사Ad-hBNP,CHF대서심장、간장、폐장、신장、비장급소장균검측도hBNP표체,외원hBNP재CHF대서체내적표체지소가지속7천.결론선병독개도적외원hBNP기인가재CHF대서다장기중득도유효표체,기생물학효응시간현저장우BNP적생물반쇠기.
