非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A羧基端蛋白的真核表达及在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染Marc-145细胞中的作用
비기육기구단백Ⅱ형중련A최기단단백적진핵표체급재저번식여호흡종합정병독감염Marc-145세포중적작용
Eukaryotic Expression of Nonmuscle Myosin Heavy Chain Ⅱ-A C-terminus Protein and Its Roles in Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Infection of Marc-145 Cells
  • 万方数据
    畜牧兽医学报 축목수의학보

    2012年 9期 1455-1462 ,共8页

    吕军华%刘宁宁%赵钦%马玉萍%张冲%王向鹏%胡守彬%赵菲菲%吴海珍%肖一红%周恩民

    려군화%류저저%조흠%마옥평%장충%왕향붕%호수빈%조비비%오해진%초일홍%주은민

    猪繁殖与呼吸综合征病毒%非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A%杆状病毒%抑制作用 豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%非肌肉肌毬蛋白Ⅱ型重鏈A%桿狀病毒%抑製作用
    저번식여호흡종합정병독%비기육기구단백Ⅱ형중련A%간상병독%억제작용
    前期研究结果证明抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5蛋白的抗独特型抗体特异性结合Marc-145细胞上的非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A(Nonmuscle myosin heavy chainⅡ-A,NMHCⅡ-A)蛋白,其结合位点位于NMHCⅡ-A的羧基端.本研究通过真核表达NMHCⅡ-A的羧基端(PRA)蛋白,验证其对PRRSV感染Marc-145细胞的作用.通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达PRA蛋白.Western blot和间接免疫荧光鉴定PRA蛋白的表达及其与Marc-145细胞的结合.通过病毒中和试验、荧光聚焦中和试验和荧光定量PCR检测PRA蛋白对PRRSV感染Marc-145细胞的作用.Western blot和间接免疫荧光结果表明,PRA蛋白在真核细胞中得到成功表达,其最高表达量为接种1个MOI杆状病毒后96 h时.PRA蛋白特异性结合Marc-145细胞,使PRRSV感染Marc-145细胞延迟24 h并且感染效率降低60％.真核表达的NMHCⅡ-A羧基端蛋白能特异性结合Marc-145细胞并有效降低PRRSV的感染.这些结果为进一步阐明NMHCⅡ-A在PRRSV感染细胞过程中的作用提供了新的依据.
    전기연구결과증명항저번식여호흡종합정병독(PRRSV) GP5단백적항독특형항체특이성결합Marc-145세포상적비기육기구단백Ⅱ형중련A(Nonmuscle myosin heavy chainⅡ-A,NMHCⅡ-A)단백,기결합위점위우NMHCⅡ-A적최기단.본연구통과진핵표체NMHCⅡ-A적최기단(PRA)단백,험증기대PRRSV감염Marc-145세포적작용.통과Bac-to-Bac간상병독표체계통표체PRA단백.Western blot화간접면역형광감정PRA단백적표체급기여Marc-145세포적결합.통과병독중화시험、형광취초중화시험화형광정량PCR검측PRA단백대PRRSV감염Marc-145세포적작용.Western blot화간접면역형광결과표명,PRA단백재진핵세포중득도성공표체,기최고표체량위접충1개MOI간상병독후96 h시.PRA단백특이성결합Marc-145세포,사PRRSV감염Marc-145세포연지24 h병차감염효솔강저60％.진핵표체적NMHCⅡ-A최기단단백능특이성결합Marc-145세포병유효강저PRRSV적감염.저사결과위진일보천명NMHCⅡ-A재PRRSV감염세포과정중적작용제공료신적의거.
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