遵义医学院学报
遵義醫學院學報
준의의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE ZUNYI
2003年
4期
319-321
,共3页
刘涛%黄雨婷%卢丽丹%唐丽娜%黄天谊
劉濤%黃雨婷%盧麗丹%唐麗娜%黃天誼
류도%황우정%로려단%당려나%황천의
弓形虫%表面抗原%P30 基因重组
弓形蟲%錶麵抗原%P30 基因重組
궁형충%표면항원%P30 기인중조
目的构建弓形虫RH株表面抗原P30基因的重组表达质粒,为下一步免疫与诊断研究制备高纯度P30重组蛋白奠定基础.方法自弓形虫RH株感染小鼠腹水中收集速殖子,用酚/氯仿法提取基因组DNA,用PCR法扩增编码P30的基因片段(经电泳切带纯化),定向插入到PQE-30表达质粒中,转化入TG1宿主菌,在含有青霉素的SOB平板上筛选阳性重组子,采用酶切、PCR扩增和DNA序列分析等方法对插入片段进行鉴定.结果阳性重组质粒PQE30-P30经Sal+HindⅢ双酶切下的插片及PCR扩增产物均与原插入的P30基因片段大小一致为976bp,通过序列测定证实插入片段为编码P30的基因片段.结论成功构建弓形虫表面抗原P30基因的重组质粒PQE30-P30.
目的構建弓形蟲RH株錶麵抗原P30基因的重組錶達質粒,為下一步免疫與診斷研究製備高純度P30重組蛋白奠定基礎.方法自弓形蟲RH株感染小鼠腹水中收集速殖子,用酚/氯倣法提取基因組DNA,用PCR法擴增編碼P30的基因片段(經電泳切帶純化),定嚮插入到PQE-30錶達質粒中,轉化入TG1宿主菌,在含有青黴素的SOB平闆上篩選暘性重組子,採用酶切、PCR擴增和DNA序列分析等方法對插入片段進行鑒定.結果暘性重組質粒PQE30-P30經Sal+HindⅢ雙酶切下的插片及PCR擴增產物均與原插入的P30基因片段大小一緻為976bp,通過序列測定證實插入片段為編碼P30的基因片段.結論成功構建弓形蟲錶麵抗原P30基因的重組質粒PQE30-P30.
목적구건궁형충RH주표면항원P30기인적중조표체질립,위하일보면역여진단연구제비고순도P30중조단백전정기출.방법자궁형충RH주감염소서복수중수집속식자,용분/록방법제취기인조DNA,용PCR법확증편마P30적기인편단(경전영절대순화),정향삽입도PQE-30표체질립중,전화입TG1숙주균,재함유청매소적SOB평판상사선양성중조자,채용매절、PCR확증화DNA서렬분석등방법대삽입편단진행감정.결과양성중조질립PQE30-P30경Sal+HindⅢ쌍매절하적삽편급PCR확증산물균여원삽입적P30기인편단대소일치위976bp,통과서렬측정증실삽입편단위편마P30적기인편단.결론성공구건궁형충표면항원P30기인적중조질립PQE30-P30.
