郑州大学学报(医学版)
鄭州大學學報(醫學版)
정주대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERISTY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
3期
483-486
,共4页
张巧%钱丽丽%刘红梅%赵国强%宫亚欧%丁兰萍%杨胜利
張巧%錢麗麗%劉紅梅%趙國彊%宮亞歐%丁蘭萍%楊勝利
장교%전려려%류홍매%조국강%궁아구%정란평%양성리
人端粒酶逆转录酶%真核表达载体%荷瘤小鼠%抗肿瘤免疫应答
人耑粒酶逆轉錄酶%真覈錶達載體%荷瘤小鼠%抗腫瘤免疫應答
인단립매역전록매%진핵표체재체%하류소서%항종류면역응답
目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)真核表达载体pcDNA3.1-hTERT,并观察其对荷瘤小鼠的抗肿瘤效应.方法:用RT-PCR方法扩增出带有Hind Ⅲ, BamHⅠ酶切位点的hTERT基因片段,与pGEM-T Easy克隆载体连接,筛选出阳性克隆,酶切获得目的片段,与pcDNA3.1载体连接,构建pcDNA3.1-hTERT表达载体.将真核表达载体pcDNA3.1-hTERT注射移植性H22肝癌模型C57BL/6小鼠,并设PBS组及转染空质粒pcDNA3.1组,观察3组的抗肿瘤效应.结果与结论:成功构建pcDNA3.1-hTERT真核表达载体.该载体中的hTERT基因片段全长为951 bp,可编码相对分子量为37 000、由317个氨基酸构成的多肽.该基因片段与GenBank公布的相应基因进行同源性比较,核苷酸序列的同源性为98.73%,编码产物的氨基酸序列的同源性为99.68%.该真核表达载体免疫荷瘤小鼠后,pcDNA3.1-hTERT组肿瘤生长受到抑制,且该组生存期分别长于PBS组及pcDNA3.1组 (P<0.05);pcDNA3.1- hTERT组的IL-2、IFN-γ细胞因子水平也均高于PBS组与pcDNA3.1组(P<0.05).提示该真核表达载体在受试动物体内可有效地诱导特异性抗肿瘤免疫应答.
目的:構建人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)真覈錶達載體pcDNA3.1-hTERT,併觀察其對荷瘤小鼠的抗腫瘤效應.方法:用RT-PCR方法擴增齣帶有Hind Ⅲ, BamHⅠ酶切位點的hTERT基因片段,與pGEM-T Easy剋隆載體連接,篩選齣暘性剋隆,酶切穫得目的片段,與pcDNA3.1載體連接,構建pcDNA3.1-hTERT錶達載體.將真覈錶達載體pcDNA3.1-hTERT註射移植性H22肝癌模型C57BL/6小鼠,併設PBS組及轉染空質粒pcDNA3.1組,觀察3組的抗腫瘤效應.結果與結論:成功構建pcDNA3.1-hTERT真覈錶達載體.該載體中的hTERT基因片段全長為951 bp,可編碼相對分子量為37 000、由317箇氨基痠構成的多肽.該基因片段與GenBank公佈的相應基因進行同源性比較,覈苷痠序列的同源性為98.73%,編碼產物的氨基痠序列的同源性為99.68%.該真覈錶達載體免疫荷瘤小鼠後,pcDNA3.1-hTERT組腫瘤生長受到抑製,且該組生存期分彆長于PBS組及pcDNA3.1組 (P<0.05);pcDNA3.1- hTERT組的IL-2、IFN-γ細胞因子水平也均高于PBS組與pcDNA3.1組(P<0.05).提示該真覈錶達載體在受試動物體內可有效地誘導特異性抗腫瘤免疫應答.
목적:구건인단립매역전록매(hTERT)진핵표체재체pcDNA3.1-hTERT,병관찰기대하류소서적항종류효응.방법:용RT-PCR방법확증출대유Hind Ⅲ, BamHⅠ매절위점적hTERT기인편단,여pGEM-T Easy극륭재체련접,사선출양성극륭,매절획득목적편단,여pcDNA3.1재체련접,구건pcDNA3.1-hTERT표체재체.장진핵표체재체pcDNA3.1-hTERT주사이식성H22간암모형C57BL/6소서,병설PBS조급전염공질립pcDNA3.1조,관찰3조적항종류효응.결과여결론:성공구건pcDNA3.1-hTERT진핵표체재체.해재체중적hTERT기인편단전장위951 bp,가편마상대분자량위37 000、유317개안기산구성적다태.해기인편단여GenBank공포적상응기인진행동원성비교,핵감산서렬적동원성위98.73%,편마산물적안기산서렬적동원성위99.68%.해진핵표체재체면역하류소서후,pcDNA3.1-hTERT조종류생장수도억제,차해조생존기분별장우PBS조급pcDNA3.1조 (P<0.05);pcDNA3.1- hTERT조적IL-2、IFN-γ세포인자수평야균고우PBS조여pcDNA3.1조(P<0.05).제시해진핵표체재체재수시동물체내가유효지유도특이성항종류면역응답.
