中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2011年
6期
145-149
,共5页
丹参酮ⅡA%抗增殖蛋白%心肌细胞%凋亡%氧化应激%钙超载
丹參酮ⅡA%抗增殖蛋白%心肌細胞%凋亡%氧化應激%鈣超載
단삼동ⅡA%항증식단백%심기세포%조망%양화응격%개초재
目的:观察丹参酮ⅡA对过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的保护作用及其对抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)表达的影响,研究PH B蛋白在心肌细胞氧化应激中的作用.方法:实验组分为正常对照组、氧化应激组、丹参酮ⅡA高、中、低剂量组、siRNA组、siRNA +氧化应激组、siRNA阴性对照组.采用差数贴壁法体外分离培养新生乳鼠心肌细胞,以200 μmol·L(-1)过氧化氢作用2h模拟心肌细胞氧化应激损伤,心肌细胞在氧化应激前给予丹参酮ⅡA(1×10-4,5×10-5,1 ×10-5mol·L(-1))预先干预24 h.采用PHB特异性的siRNA干扰心肌细胞PHB蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率、[ca2+]i及心肌细胞线粒体膜电位的变化,Western blotting检测PHB蛋白表达水平.结果:与正常对照组比较,氧化应激组心肌细胞经200 μmol· L(-1)过氧化氢作用2h后,PHB蛋白表达显著增加,细胞内游离钙浓度、凋亡率显著增高,线粒体膜电位显著降低.与氧化应激组比较,丹参酮ⅡA可呈浓度依赖性显著降低细胞内游离钙浓度及细胞凋亡率,增加线粒体膜电位,降低PHB蛋白表达水平.与siRNA阴性对照组比较,siRNA组心肌细胞内PHB蛋白表达可被显著抑制,且细胞内游离钙浓度和细胞凋亡率显著增加,线粒体膜电位显著降低.结论:PHB蛋白在心肌细胞氧化应激中可代偿性增加,对心肌细胞具有保护作用.丹参酮ⅡA可减少氧化应激损伤心肌细胞内PHB蛋白表达,其机制可能与丹参酮ⅡA减轻心肌细胞氧化应激损伤从而减少心肌细胞自身代偿性作用有关.
目的:觀察丹參酮ⅡA對過氧化氫誘導的心肌細胞凋亡的保護作用及其對抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)錶達的影響,研究PH B蛋白在心肌細胞氧化應激中的作用.方法:實驗組分為正常對照組、氧化應激組、丹參酮ⅡA高、中、低劑量組、siRNA組、siRNA +氧化應激組、siRNA陰性對照組.採用差數貼壁法體外分離培養新生乳鼠心肌細胞,以200 μmol·L(-1)過氧化氫作用2h模擬心肌細胞氧化應激損傷,心肌細胞在氧化應激前給予丹參酮ⅡA(1×10-4,5×10-5,1 ×10-5mol·L(-1))預先榦預24 h.採用PHB特異性的siRNA榦擾心肌細胞PHB蛋白錶達,流式細胞儀檢測細胞凋亡率、[ca2+]i及心肌細胞線粒體膜電位的變化,Western blotting檢測PHB蛋白錶達水平.結果:與正常對照組比較,氧化應激組心肌細胞經200 μmol· L(-1)過氧化氫作用2h後,PHB蛋白錶達顯著增加,細胞內遊離鈣濃度、凋亡率顯著增高,線粒體膜電位顯著降低.與氧化應激組比較,丹參酮ⅡA可呈濃度依賴性顯著降低細胞內遊離鈣濃度及細胞凋亡率,增加線粒體膜電位,降低PHB蛋白錶達水平.與siRNA陰性對照組比較,siRNA組心肌細胞內PHB蛋白錶達可被顯著抑製,且細胞內遊離鈣濃度和細胞凋亡率顯著增加,線粒體膜電位顯著降低.結論:PHB蛋白在心肌細胞氧化應激中可代償性增加,對心肌細胞具有保護作用.丹參酮ⅡA可減少氧化應激損傷心肌細胞內PHB蛋白錶達,其機製可能與丹參酮ⅡA減輕心肌細胞氧化應激損傷從而減少心肌細胞自身代償性作用有關.
목적:관찰단삼동ⅡA대과양화경유도적심기세포조망적보호작용급기대항증식단백(prohibitin,PHB)표체적영향,연구PH B단백재심기세포양화응격중적작용.방법:실험조분위정상대조조、양화응격조、단삼동ⅡA고、중、저제량조、siRNA조、siRNA +양화응격조、siRNA음성대조조.채용차수첩벽법체외분리배양신생유서심기세포,이200 μmol·L(-1)과양화경작용2h모의심기세포양화응격손상,심기세포재양화응격전급여단삼동ⅡA(1×10-4,5×10-5,1 ×10-5mol·L(-1))예선간예24 h.채용PHB특이성적siRNA간우심기세포PHB단백표체,류식세포의검측세포조망솔、[ca2+]i급심기세포선립체막전위적변화,Western blotting검측PHB단백표체수평.결과:여정상대조조비교,양화응격조심기세포경200 μmol· L(-1)과양화경작용2h후,PHB단백표체현저증가,세포내유리개농도、조망솔현저증고,선립체막전위현저강저.여양화응격조비교,단삼동ⅡA가정농도의뢰성현저강저세포내유리개농도급세포조망솔,증가선립체막전위,강저PHB단백표체수평.여siRNA음성대조조비교,siRNA조심기세포내PHB단백표체가피현저억제,차세포내유리개농도화세포조망솔현저증가,선립체막전위현저강저.결론:PHB단백재심기세포양화응격중가대상성증가,대심기세포구유보호작용.단삼동ⅡA가감소양화응격손상심기세포내PHB단백표체,기궤제가능여단삼동ⅡA감경심기세포양화응격손상종이감소심기세포자신대상성작용유관.
