CAJ | 학술논문

目的:比较表面不同修饰的两种多壁碳纳米管,即羧基化多壁碳纳米管(carboxylic multi-walled carbon nanotubes,c-MWCNTs)和牛磺酸修饰的多壁碳纳米管(taurine-modified multi-walled carbon nanotubes,tau-MWCNTs)对RAW264.7细胞的毒性,初步探究内质网在MWCNTs诱导细胞凋亡中的作用.方法:用尺寸和杂质含量一致的tau-MWCNTs和c-MWCNTs以0、1.56、3.12、6.25、12.50、25.00μg/cm2剂量染毒RAW264.7细胞3、6、12、24 h,通过WST-1法和AnnexinV-FITC/PI双染,检测细胞毒性和细胞凋亡.应用实时荧光定量PCR技术,检测与内质网钙离子调控、应激和凋亡相关的CRT、GRP78以及CHOP的mRNA表达水平.结果:tau-MWCNTs在所有的染毒剂量和染毒时间内,细胞毒性均比c-MWCNTs低.在≥12.50μg/cm2剂量下染毒3 h以上,或在≥3.12μg/cm2剂量下染毒12 h以上,两种MWCNTs均能产生明显的细胞毒性且差异有统计学意义(P＜0.05).凋亡检测发现,两种MWCNTs染毒细胞24 h的细胞凋亡率显著高于12 h,且c-MWCNTs组的凋亡率普遍高于tau-MWCNTs组.实时荧光定量PCR结果显示,在所研究的染毒剂量及时间内,CRT、GRP78和CHOP mRNA表达与对照相比差异很小,无统计学意义.结论:tau-MWCNTs对RAW264.7细胞的毒性较c-MWCNTs明显降低,未观察到MWCNTs对RAW264.7细胞内质网造成损伤,提示内质网通路可能不是MWCNTs导致细胞凋亡的主要机制.
목적:비교표면불동수식적량충다벽탄납미관,즉최기화다벽탄납미관(carboxylic multi-walled carbon nanotubes,c-MWCNTs)화우광산수식적다벽탄납미관(taurine-modified multi-walled carbon nanotubes,tau-MWCNTs)대RAW264.7세포적독성,초보탐구내질망재MWCNTs유도세포조망중적작용.방법:용척촌화잡질함량일치적tau-MWCNTs화c-MWCNTs이0、1.56、3.12、6.25、12.50、25.00μg/cm2제량염독RAW264.7세포3、6、12、24 h,통과WST-1법화AnnexinV-FITC/PI쌍염,검측세포독성화세포조망.응용실시형광정량PCR기술,검측여내질망개리자조공、응격화조망상관적CRT、GRP78이급CHOP적mRNA표체수평.결과:tau-MWCNTs재소유적염독제량화염독시간내,세포독성균비c-MWCNTs저.재≥12.50μg/cm2제량하염독3 h이상,혹재≥3.12μg/cm2제량하염독12 h이상,량충MWCNTs균능산생명현적세포독성차차이유통계학의의(P＜0.05).조망검측발현,량충MWCNTs염독세포24 h적세포조망솔현저고우12 h,차c-MWCNTs조적조망솔보편고우tau-MWCNTs조.실시형광정량PCR결과현시,재소연구적염독제량급시간내,CRT、GRP78화CHOP mRNA표체여대조상비차이흔소,무통계학의의.결론:tau-MWCNTs대RAW264.7세포적독성교c-MWCNTs명현강저,미관찰도MWCNTs대RAW264.7세포내질망조성손상,제시내질망통로가능불시MWCNTs도치세포조망적주요궤제.