解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
6期
726-730
,共5页
欧阳长杰%滕大才%曲德伟%王德广%徐铁军
歐暘長傑%滕大纔%麯德偉%王德廣%徐鐵軍
구양장걸%등대재%곡덕위%왕덕엄%서철군
脑源性神经营养因子%基因表达%神经干细胞%分化%反转录-聚合酶链式反应%免疫组织化学%大鼠
腦源性神經營養因子%基因錶達%神經榦細胞%分化%反轉錄-聚閤酶鏈式反應%免疫組織化學%大鼠
뇌원성신경영양인자%기인표체%신경간세포%분화%반전록-취합매련식반응%면역조직화학%대서
目的 构建脑源性神经营养因子(BDNF)基因真核表达载体,探讨BDNF过表达对神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响.方法 采用RT-PCR 法,以大鼠海马组织RNA为模板,扩增BDNF基因,定向克隆到pEGFP-N1载体中,用脂质体法转染pEGFP-N1-BDNF表达载体至NSCs中,然后用RT-PCR鉴定BDNF的表达,免疫组织化学方法鉴定NSCs向神经元的分化情况.结果 成功构建了pEGFP-N1-BDNF真核表达载体,BDNF在重组质粒转染的NSCs中能够高效表达.重组质粒转染的NSCs在体外诱导分化后,能够较空质粒转染的NSCs产生更多的神经元(P<0.01).结论 BDNF过表达能够显著促进大鼠NSCs向神经元方向分化.
目的 構建腦源性神經營養因子(BDNF)基因真覈錶達載體,探討BDNF過錶達對神經榦細胞(NSCs)嚮神經元分化的影響.方法 採用RT-PCR 法,以大鼠海馬組織RNA為模闆,擴增BDNF基因,定嚮剋隆到pEGFP-N1載體中,用脂質體法轉染pEGFP-N1-BDNF錶達載體至NSCs中,然後用RT-PCR鑒定BDNF的錶達,免疫組織化學方法鑒定NSCs嚮神經元的分化情況.結果 成功構建瞭pEGFP-N1-BDNF真覈錶達載體,BDNF在重組質粒轉染的NSCs中能夠高效錶達.重組質粒轉染的NSCs在體外誘導分化後,能夠較空質粒轉染的NSCs產生更多的神經元(P<0.01).結論 BDNF過錶達能夠顯著促進大鼠NSCs嚮神經元方嚮分化.
목적 구건뇌원성신경영양인자(BDNF)기인진핵표체재체,탐토BDNF과표체대신경간세포(NSCs)향신경원분화적영향.방법 채용RT-PCR 법,이대서해마조직RNA위모판,확증BDNF기인,정향극륭도pEGFP-N1재체중,용지질체법전염pEGFP-N1-BDNF표체재체지NSCs중,연후용RT-PCR감정BDNF적표체,면역조직화학방법감정NSCs향신경원적분화정황.결과 성공구건료pEGFP-N1-BDNF진핵표체재체,BDNF재중조질립전염적NSCs중능구고효표체.중조질립전염적NSCs재체외유도분화후,능구교공질립전염적NSCs산생경다적신경원(P<0.01).결론 BDNF과표체능구현저촉진대서NSCs향신경원방향분화.