畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
10期
1463-1469
,共7页
张霞%屈平平%丛霞%姜忠玲%崔凯%田文儒
張霞%屈平平%叢霞%薑忠玲%崔凱%田文儒
장하%굴평평%총하%강충령%최개%전문유
小鼠胚胎%热应激%HSP70表达%超微结构
小鼠胚胎%熱應激%HSP70錶達%超微結構
소서배태%열응격%HSP70표체%초미결구
本研究旨在确定体外培养的小鼠胚胎细胞合成HSP70的时期,研究热应激对该阶段胚胎细胞超微结构的影响.将合子和体外发育至2-细胞、4-细胞、8～16-细胞及囊胚阶段的胚胎分别进行37、39和41℃的热应激处理,用免疫荧光细胞化学法检测胚胎细胞中HSP70的诱导表达；将体外培养至早期囊胚的小鼠胚胎分别施以39℃2h和41℃2h处理,分别在热应激后0和2h时收集胚胎,制作超薄切片,用电子显微镜观察胚胎细胞的超微结构变化.在各细胞期胚胎中,37℃组胚胎HSP70表达阴性(一)；39℃组胚胎,从8～16-细胞开始呈现弱表达(+),囊胚呈阳性表达(++)；41℃组的胚胎从4-细胞开始呈现弱阳性表达(+),8～16-细胞胚胎和囊胚呈阳性表达(++).39和41℃热应激处理的小鼠早期囊胚超微结构和对照组均发生明显的变化,但经37℃恢复培养2h后,39℃组胚胎的各细胞器超微结构恢复正常,而41℃组胚胎未能恢复.结果表明,小鼠胚胎从4-细胞期有HSP70的诱导合成,在囊胚期诱导合成最多；热应激使胚胎亚细胞结构出现退行性变化,轻度退行性变化是可逆的.
本研究旨在確定體外培養的小鼠胚胎細胞閤成HSP70的時期,研究熱應激對該階段胚胎細胞超微結構的影響.將閤子和體外髮育至2-細胞、4-細胞、8～16-細胞及囊胚階段的胚胎分彆進行37、39和41℃的熱應激處理,用免疫熒光細胞化學法檢測胚胎細胞中HSP70的誘導錶達；將體外培養至早期囊胚的小鼠胚胎分彆施以39℃2h和41℃2h處理,分彆在熱應激後0和2h時收集胚胎,製作超薄切片,用電子顯微鏡觀察胚胎細胞的超微結構變化.在各細胞期胚胎中,37℃組胚胎HSP70錶達陰性(一)；39℃組胚胎,從8～16-細胞開始呈現弱錶達(+),囊胚呈暘性錶達(++)；41℃組的胚胎從4-細胞開始呈現弱暘性錶達(+),8～16-細胞胚胎和囊胚呈暘性錶達(++).39和41℃熱應激處理的小鼠早期囊胚超微結構和對照組均髮生明顯的變化,但經37℃恢複培養2h後,39℃組胚胎的各細胞器超微結構恢複正常,而41℃組胚胎未能恢複.結果錶明,小鼠胚胎從4-細胞期有HSP70的誘導閤成,在囊胚期誘導閤成最多；熱應激使胚胎亞細胞結構齣現退行性變化,輕度退行性變化是可逆的.
본연구지재학정체외배양적소서배태세포합성HSP70적시기,연구열응격대해계단배태세포초미결구적영향.장합자화체외발육지2-세포、4-세포、8～16-세포급낭배계단적배태분별진행37、39화41℃적열응격처리,용면역형광세포화학법검측배태세포중HSP70적유도표체；장체외배양지조기낭배적소서배태분별시이39℃2h화41℃2h처리,분별재열응격후0화2h시수집배태,제작초박절편,용전자현미경관찰배태세포적초미결구변화.재각세포기배태중,37℃조배태HSP70표체음성(일)；39℃조배태,종8～16-세포개시정현약표체(+),낭배정양성표체(++)；41℃조적배태종4-세포개시정현약양성표체(+),8～16-세포배태화낭배정양성표체(++).39화41℃열응격처리적소서조기낭배초미결구화대조조균발생명현적변화,단경37℃회복배양2h후,39℃조배태적각세포기초미결구회복정상,이41℃조배태미능회복.결과표명,소서배태종4-세포기유HSP70적유도합성,재낭배기유도합성최다；열응격사배태아세포결구출현퇴행성변화,경도퇴행성변화시가역적.
