CAJ | 학술논문

目的观察体外树突状细胞(DC)感染编码Her2/neu基因膜外第一受体区(Her2-ECDs)、全长膜外区(Her2-ECD)和膜外跨膜区(Her2-TM)蛋白3种重组腺病毒(rAdHer2-ECDs、rAdHer2-ECD和rAdHer2-TM)后的免疫功能变化.方法重组腺病毒感染未成熟DC后,Western blot法检测目的蛋白在DC中的表达.ELISA法检测DC感染3个重组腺病毒后的白介素-12(IL-12)分泌水平及与淋巴细胞共孵育后上清中干扰素-γ(IFN-γ)的含量.采用混合白细胞反应检测DC感染前后刺激同种异体淋巴细胞的增殖能力.MTT法检测细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性.结果 Her2-ECDs、ECD、TM蛋白在DC中获得表达.转染DC培养第5天,上清中IL-12含量比未转染DC含量高(P＜0.05),但3种重组病毒之间无明显差异(P＞0.05).DC刺激淋巴细胞增殖后培养上清中IFN-γ的含量显示随着时间的延长逐步增高,但病毒感染DC明显高于非感染DC.DC明显介导淋巴细胞增殖反应,除rAdHer2-TM感染DC外,另两种转染和非转染DC之间无差异(P＞0.05).在DC诱导的CTL反应中,病毒感染DC诱导的杀伤率明显高于SK-OV-3修饰和非修饰DC,而SK-OV-3修饰又高于非修饰DC杀伤率(P＜0.05).在病毒感染DC中,以rAdHer2-TM转染DC激发的CTL活性为最强.对高表达Her2/neu蛋白的乳腺癌细胞株的杀伤率明显高于对Her2/neu表达阴性的杀伤率(P＜0.05).结论编码Her2/neu膜外及跨膜区蛋白重组腺病毒转染DC后,明显增强DC的抗肿瘤免疫功能,诱导出Her2/neu特异性的CTL活性.
목적 관찰체외수돌상세포(DC)감염편마Her2/neu기인막외제일수체구(Her2-ECDs)、전장막외구(Her2-ECD)화막외과막구(Her2-TM)단백3충중조선병독(rAdHer2-ECDs、rAdHer2-ECD화rAdHer2-TM)후적면역공능변화.방법 중조선병독감염미성숙DC후,Western blot법검측목적단백재DC중적표체.ELISA법검측DC감염3개중조선병독후적백개소-12(IL-12)분비수평급여림파세포공부육후상청중간우소-γ(IFN-γ)적함량.채용혼합백세포반응검측DC감염전후자격동충이체림파세포적증식능력.MTT법검측세포독T림파세포(CTL)활성.결과 Her2-ECDs、ECD、TM단백재DC중획득표체.전염DC배양제5천,상청중IL-12함량비미전염DC함량고(P＜0.05),단3충중조병독지간무명현차이(P＞0.05).DC자격림파세포증식후배양상청중IFN-γ적함량현시수착시간적연장축보증고,단병독감염DC명현고우비감염DC.DC명현개도림파세포증식반응,제rAdHer2-TM감염DC외,령량충전염화비전염DC지간무차이(P＞0.05).재DC유도적CTL반응중,병독감염DC유도적살상솔명현고우SK-OV-3수식화비수식DC,이SK-OV-3수식우고우비수식DC살상솔(P＜0.05).재병독감염DC중,이rAdHer2-TM전염DC격발적CTL활성위최강.대고표체Her2/neu단백적유선암세포주적살상솔명현고우대Her2/neu표체음성적살상솔(P＜0.05).결론 편마Her2/neu막외급과막구단백중조선병독전염DC후,명현증강DC적항종류면역공능,유도출Her2/neu특이성적CTL활성.