肿瘤基础与临床
腫瘤基礎與臨床
종류기출여림상
JOURNAL OF BASIC AND CLINICAL ONCOLOGY
2008年
2期
99-102
,共4页
喉鳞癌%VEGF-C%RNA干扰%Hep-2细胞株
喉鱗癌%VEGF-C%RNA榦擾%Hep-2細胞株
후린암%VEGF-C%RNA간우%Hep-2세포주
目的 构建针对喉鳞癌细胞株Hep-2中血管内皮生长因子C(vascular endothelial growthfactor C,VEGF-C)的siRNA表达载体,研究载体介导的RNAi技术对喉鳞癌细胞株Hep-2中VEGF-C mRNA表达的抑制作用.方法 依据siRNA靶序列的设计原则,以VEGF-C为靶基因,同时随机组合出一条对照序列,分别合成2对编码短发卡结构的两条DNA序列,经退火合成互补DNA双链,克隆入siRNA表达载体pSuper-neo中,转化鉴定后进行PCR和DNA序列测定.用脂质体介导转染入喉鳞癌Hep-2细胞株,采用RTPCR方法检测细胞VEGF-C基因mRNA水平的变化.结果 成功构建发卡样VEGF-C siRNA真核表达载体;转染VEGF-C靶向siRNA(pSuper-neo-siV1)的Hep-2细胞,VEGF-C基因的表达水平较无关对照组pSuper-neo-siV2和转染空载体pSuper-neo的对照组显著下降.结论 成功构建载体介导的VEGF-C靶向RNA干扰重组体,并能有效抑制Hep-2细胞中VEGF-C mRNA表达.
目的 構建針對喉鱗癌細胞株Hep-2中血管內皮生長因子C(vascular endothelial growthfactor C,VEGF-C)的siRNA錶達載體,研究載體介導的RNAi技術對喉鱗癌細胞株Hep-2中VEGF-C mRNA錶達的抑製作用.方法 依據siRNA靶序列的設計原則,以VEGF-C為靶基因,同時隨機組閤齣一條對照序列,分彆閤成2對編碼短髮卡結構的兩條DNA序列,經退火閤成互補DNA雙鏈,剋隆入siRNA錶達載體pSuper-neo中,轉化鑒定後進行PCR和DNA序列測定.用脂質體介導轉染入喉鱗癌Hep-2細胞株,採用RTPCR方法檢測細胞VEGF-C基因mRNA水平的變化.結果 成功構建髮卡樣VEGF-C siRNA真覈錶達載體;轉染VEGF-C靶嚮siRNA(pSuper-neo-siV1)的Hep-2細胞,VEGF-C基因的錶達水平較無關對照組pSuper-neo-siV2和轉染空載體pSuper-neo的對照組顯著下降.結論 成功構建載體介導的VEGF-C靶嚮RNA榦擾重組體,併能有效抑製Hep-2細胞中VEGF-C mRNA錶達.
목적 구건침대후린암세포주Hep-2중혈관내피생장인자C(vascular endothelial growthfactor C,VEGF-C)적siRNA표체재체,연구재체개도적RNAi기술대후린암세포주Hep-2중VEGF-C mRNA표체적억제작용.방법 의거siRNA파서렬적설계원칙,이VEGF-C위파기인,동시수궤조합출일조대조서렬,분별합성2대편마단발잡결구적량조DNA서렬,경퇴화합성호보DNA쌍련,극륭입siRNA표체재체pSuper-neo중,전화감정후진행PCR화DNA서렬측정.용지질체개도전염입후린암Hep-2세포주,채용RTPCR방법검측세포VEGF-C기인mRNA수평적변화.결과 성공구건발잡양VEGF-C siRNA진핵표체재체;전염VEGF-C파향siRNA(pSuper-neo-siV1)적Hep-2세포,VEGF-C기인적표체수평교무관대조조pSuper-neo-siV2화전염공재체pSuper-neo적대조조현저하강.결론 성공구건재체개도적VEGF-C파향RNA간우중조체,병능유효억제Hep-2세포중VEGF-C mRNA표체.
