CAJ | 학술논문

目的:目前在胰腺干细胞体外转分化为胰岛样细胞的转化效率,转分化胰岛样细胞的成熟度,能否代替天然胰岛的功能等问题上存在争议.实验将分离纯化、扩增的大鼠胰腺导管上皮细胞,并诱导分化为胰岛样细胞团,与天然胰岛功能进行比较.方法:实验于2004 07/2005-04在暨南大学第二临床医学院暨深圳市人民医院临床医学研究中心实验室完成.实验选用SD大鼠10只,采用差异性贴学、低血清培养等方法纯化大鼠胰腺导管上皮细胞,以免疫组织化学方法鉴定后,在含exendin-4、角质细胞生长因子、尼克酰胺等细胞因子和葡萄糖的培养基中,将其转分化为胰岛样细胞团.以DTZ染色和胰岛素免疫荧光染色鉴定.分离纯化SD大鼠天然胰岛,对胰岛样细胞团与天然胰岛进行葡萄糖刺激试验,检测培养液上清液中胰岛素和C肽的水平.结果:①免疫组织化学染色显示从大鼠胰腺导管上皮细胞分离纯化的细胞呈CK-19染色阳性,PDX-1染色阴性,表明为胰腺干细胞.诱导4周后,细胞逐渐汇聚成胰岛样细胞团,免疫荧光染色为阳性,证明有胰岛索分泌.②葡萄糖刺激实验显示,在低糖和高糖刺激下,胰岛样细胞团胰岛素的分泌量约为天然胰岛的1/30和1/35,C肽分泌量为天然胰岛的1/32和1/26.结论:目前胰腺干细胞体外转分化为胰岛样细胞的成熟度与天然胰岛仍然存在较大差别,其在功能仅为天然胰岛的1/30～1/35.
목적:목전재이선간세포체외전분화위이도양세포적전화효솔,전분화이도양세포적성숙도,능부대체천연이도적공능등문제상존재쟁의.실험장분리순화、확증적대서이선도관상피세포,병유도분화위이도양세포단,여천연이도공능진행비교.방법:실험우2004 07/2005-04재기남대학제이림상의학원기심수시인민의원림상의학연구중심실험실완성.실험선용SD대서10지,채용차이성첩학、저혈청배양등방법순화대서이선도관상피세포,이면역조직화학방법감정후,재함exendin-4、각질세포생장인자、니극선알등세포인자화포도당적배양기중,장기전분화위이도양세포단.이DTZ염색화이도소면역형광염색감정.분리순화SD대서천연이도,대이도양세포단여천연이도진행포도당자격시험,검측배양액상청액중이도소화C태적수평.결과:①면역조직화학염색현시종대서이선도관상피세포분리순화적세포정CK-19염색양성,PDX-1염색음성,표명위이선간세포.유도4주후,세포축점회취성이도양세포단,면역형광염색위양성,증명유이도색분비.②포도당자격실험현시,재저당화고당자격하,이도양세포단이도소적분비량약위천연이도적1/30화1/35,C태분비량위천연이도적1/32화1/26.결론:목전이선간세포체외전분화위이도양세포적성숙도여천연이도잉연존재교대차별,기재공능부위천연이도적1/30～1/35.