中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2008年
12期
25-29
,共5页
李明%孙桂荣%陈其新%刘孟洲%石晓卫%赵巧辉%杨跃霞
李明%孫桂榮%陳其新%劉孟洲%石曉衛%趙巧輝%楊躍霞
리명%손계영%진기신%류맹주%석효위%조교휘%양약하
骨形态发生蛋白4%成熟肽基因%克隆%反转录-PCR
骨形態髮生蛋白4%成熟肽基因%剋隆%反轉錄-PCR
골형태발생단백4%성숙태기인%극륭%반전록-PCR
克隆猪骨形态发生蛋白4(BMP-4)成熟肽基因.通过提取猪肾的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出目的基因.并将其回收后与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,进行阳性克隆的筛选与鉴定.琼脂糖凝胶电泳检测RT-PCR产物,显示结果与预期片段大小一致,质粒PCR检测、酶切鉴定证实重组克隆中插入了PCR产物,测序结果揭示BMP-4成熟肽cDNA长为351bp,编码116个氨基酸.序列对比表明,猪与人、小鼠、牛、绵羊BMP-4成熟肽cDNA序列的同源性分别为94.87%、90.60%、94.87%、94.59%,而相应的氨基酸同源性分别为99.12%,99.12%,100%、100%.首次成功地克隆了猪BMP-4成熟肽编码基因.对于进一步研究猪BMP-4全基因结构、功能及其与繁殖性能的关系有重要的意义.
剋隆豬骨形態髮生蛋白4(BMP-4)成熟肽基因.通過提取豬腎的總RNA,通過RT-PCR技術擴增齣目的基因.併將其迴收後與pMD18-T載體連接,轉化大腸桿菌TOP10感受態細胞,進行暘性剋隆的篩選與鑒定.瓊脂糖凝膠電泳檢測RT-PCR產物,顯示結果與預期片段大小一緻,質粒PCR檢測、酶切鑒定證實重組剋隆中插入瞭PCR產物,測序結果揭示BMP-4成熟肽cDNA長為351bp,編碼116箇氨基痠.序列對比錶明,豬與人、小鼠、牛、綿羊BMP-4成熟肽cDNA序列的同源性分彆為94.87%、90.60%、94.87%、94.59%,而相應的氨基痠同源性分彆為99.12%,99.12%,100%、100%.首次成功地剋隆瞭豬BMP-4成熟肽編碼基因.對于進一步研究豬BMP-4全基因結構、功能及其與繁殖性能的關繫有重要的意義.
극륭저골형태발생단백4(BMP-4)성숙태기인.통과제취저신적총RNA,통과RT-PCR기술확증출목적기인.병장기회수후여pMD18-T재체련접,전화대장간균TOP10감수태세포,진행양성극륭적사선여감정.경지당응효전영검측RT-PCR산물,현시결과여예기편단대소일치,질립PCR검측、매절감정증실중조극륭중삽입료PCR산물,측서결과게시BMP-4성숙태cDNA장위351bp,편마116개안기산.서렬대비표명,저여인、소서、우、면양BMP-4성숙태cDNA서렬적동원성분별위94.87%、90.60%、94.87%、94.59%,이상응적안기산동원성분별위99.12%,99.12%,100%、100%.수차성공지극륭료저BMP-4성숙태편마기인.대우진일보연구저BMP-4전기인결구、공능급기여번식성능적관계유중요적의의.
