中华妇产科杂志
中華婦產科雜誌
중화부산과잡지
CHINESE JOUNAL OF OBSTETRICS AND GYNECOLOGY
2003年
10期
621-624
,共4页
刘晓军%徐丛剑%金志军%刘彦%戴霏寒%韩峻松%田培坤%顾健人
劉曉軍%徐叢劍%金誌軍%劉彥%戴霏寒%韓峻鬆%田培坤%顧健人
류효군%서총검%금지군%류언%대비한%한준송%전배곤%고건인
卵巢肿瘤%基因疗法%疱疹病毒1型,人%胸苷激酶
卵巢腫瘤%基因療法%皰疹病毒1型,人%胸苷激酶
란소종류%기인요법%포진병독1형,인%흉감격매
目的探讨靶向非病毒载体GE7在卵巢癌细胞株CAOV3细胞中的转导效率,及其介导的Ⅰ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(HSV1-tk)/更昔洛韦(GCV)基因治疗系统在卵巢癌治疗中的应用.方法构建由表皮生长因子受体(EGFR)介导的非病毒载体GE7,分别与外源基因[即报告基因β-半乳糖苷酶(β-gal)和治疗基因HSV1-tk]构成载体复合物,体外转导CAOV3细胞,通过5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷(X-gal)染色、核酸分子印记杂交分析, 观察非病毒载体GE7对外源基因β-gal及HSV1-tk基因的转导情况;将 GCV加入转导HSV1-tk基因的CAOV3细胞,通过细胞生长抑制曲线、流式细胞仪分析等,观察其对肿瘤细胞的杀伤作用.结果β-gal基因的转导效率可达80%,呈瞬时表达;加入10 mg/L的GCV时,转导HSV1-tk基因的CAOV3细胞的生长抑制率可达95%;流式细胞仪分析显示,CAOV3细胞S期比例上升,最高达90%,凋亡指数高达30.结论 GE7载体系统能高效地将外源基因导入CAOV3细胞,GE7/ HSV1-tk /GCV基因治疗系统在卵巢癌治疗中可能具有良好的应用前景.
目的探討靶嚮非病毒載體GE7在卵巢癌細胞株CAOV3細胞中的轉導效率,及其介導的Ⅰ型單純皰疹病毒胸腺嘧啶覈苷激酶(HSV1-tk)/更昔洛韋(GCV)基因治療繫統在卵巢癌治療中的應用.方法構建由錶皮生長因子受體(EGFR)介導的非病毒載體GE7,分彆與外源基因[即報告基因β-半乳糖苷酶(β-gal)和治療基因HSV1-tk]構成載體複閤物,體外轉導CAOV3細胞,通過5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷(X-gal)染色、覈痠分子印記雜交分析, 觀察非病毒載體GE7對外源基因β-gal及HSV1-tk基因的轉導情況;將 GCV加入轉導HSV1-tk基因的CAOV3細胞,通過細胞生長抑製麯線、流式細胞儀分析等,觀察其對腫瘤細胞的殺傷作用.結果β-gal基因的轉導效率可達80%,呈瞬時錶達;加入10 mg/L的GCV時,轉導HSV1-tk基因的CAOV3細胞的生長抑製率可達95%;流式細胞儀分析顯示,CAOV3細胞S期比例上升,最高達90%,凋亡指數高達30.結論 GE7載體繫統能高效地將外源基因導入CAOV3細胞,GE7/ HSV1-tk /GCV基因治療繫統在卵巢癌治療中可能具有良好的應用前景.
목적탐토파향비병독재체GE7재란소암세포주CAOV3세포중적전도효솔,급기개도적Ⅰ형단순포진병독흉선밀정핵감격매(HSV1-tk)/경석락위(GCV)기인치료계통재란소암치료중적응용.방법구건유표피생장인자수체(EGFR)개도적비병독재체GE7,분별여외원기인[즉보고기인β-반유당감매(β-gal)화치료기인HSV1-tk]구성재체복합물,체외전도CAOV3세포,통과5-추-4-록-3-신타-β-D반유당감(X-gal)염색、핵산분자인기잡교분석, 관찰비병독재체GE7대외원기인β-gal급HSV1-tk기인적전도정황;장 GCV가입전도HSV1-tk기인적CAOV3세포,통과세포생장억제곡선、류식세포의분석등,관찰기대종류세포적살상작용.결과β-gal기인적전도효솔가체80%,정순시표체;가입10 mg/L적GCV시,전도HSV1-tk기인적CAOV3세포적생장억제솔가체95%;류식세포의분석현시,CAOV3세포S기비례상승,최고체90%,조망지수고체30.결론 GE7재체계통능고효지장외원기인도입CAOV3세포,GE7/ HSV1-tk /GCV기인치료계통재란소암치료중가능구유량호적응용전경.
