世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2003年
7期
916-919
,共4页
吕贯廷%卢冰%白玉杰%张剑%阎小君
呂貫廷%盧冰%白玉傑%張劍%閻小君
려관정%로빙%백옥걸%장검%염소군
目的:通过TDI-FP法检测肝细胞癌组织中HBV DNA核心启动子区A1762 T和G1764A双突变并分析二者之间的相关性,同时建立一种新的突变检测方法.方法:以20例肝细胞癌组织为研究标本,通过PCR扩增含有HBV DNA核心启动子区的DNA片段,然后用TDI-FP法检测R110或TAMRA标记ddNTP的FP值,鉴定nt1762和nt1764的基因型.结果:20例肝细胞癌组织中经HBV检测试剂盒鉴定后,18例为HBV感染阳性,阳性率为90%.经TDI-FP检测,其中有13例为T1762和A1764双突变型,1例为T1762-A1764/A1762-G1764突变杂合型,4例检测结果为阴性.经测序,阳性结果及突变杂合型与TDI-FP结果完全吻合,阴性结果中2例在nt1762前有8个核苷酸缺失突变,导致突变检测引物无法与模板结合,故产生TDI-FP检测出现假阴性结果.在肝细胞癌组织HBV DNA中,Ti762-A1764突变阳性率为75%,突变杂合型为5%,野生型为10%.结论:在肝细胞癌组织中,HBV感染率非常高,而且其核心启动子区出现nt1762和nt1764双突变率较高,提示双突变与肝细胞癌关系密切;同时本实验所建立的TDI-FP法操作快速简便,可以进行高通量自动化操作,具有进一步推广应用的前景.
目的:通過TDI-FP法檢測肝細胞癌組織中HBV DNA覈心啟動子區A1762 T和G1764A雙突變併分析二者之間的相關性,同時建立一種新的突變檢測方法.方法:以20例肝細胞癌組織為研究標本,通過PCR擴增含有HBV DNA覈心啟動子區的DNA片段,然後用TDI-FP法檢測R110或TAMRA標記ddNTP的FP值,鑒定nt1762和nt1764的基因型.結果:20例肝細胞癌組織中經HBV檢測試劑盒鑒定後,18例為HBV感染暘性,暘性率為90%.經TDI-FP檢測,其中有13例為T1762和A1764雙突變型,1例為T1762-A1764/A1762-G1764突變雜閤型,4例檢測結果為陰性.經測序,暘性結果及突變雜閤型與TDI-FP結果完全吻閤,陰性結果中2例在nt1762前有8箇覈苷痠缺失突變,導緻突變檢測引物無法與模闆結閤,故產生TDI-FP檢測齣現假陰性結果.在肝細胞癌組織HBV DNA中,Ti762-A1764突變暘性率為75%,突變雜閤型為5%,野生型為10%.結論:在肝細胞癌組織中,HBV感染率非常高,而且其覈心啟動子區齣現nt1762和nt1764雙突變率較高,提示雙突變與肝細胞癌關繫密切;同時本實驗所建立的TDI-FP法操作快速簡便,可以進行高通量自動化操作,具有進一步推廣應用的前景.
목적:통과TDI-FP법검측간세포암조직중HBV DNA핵심계동자구A1762 T화G1764A쌍돌변병분석이자지간적상관성,동시건립일충신적돌변검측방법.방법:이20례간세포암조직위연구표본,통과PCR확증함유HBV DNA핵심계동자구적DNA편단,연후용TDI-FP법검측R110혹TAMRA표기ddNTP적FP치,감정nt1762화nt1764적기인형.결과:20례간세포암조직중경HBV검측시제합감정후,18례위HBV감염양성,양성솔위90%.경TDI-FP검측,기중유13례위T1762화A1764쌍돌변형,1례위T1762-A1764/A1762-G1764돌변잡합형,4례검측결과위음성.경측서,양성결과급돌변잡합형여TDI-FP결과완전문합,음성결과중2례재nt1762전유8개핵감산결실돌변,도치돌변검측인물무법여모판결합,고산생TDI-FP검측출현가음성결과.재간세포암조직HBV DNA중,Ti762-A1764돌변양성솔위75%,돌변잡합형위5%,야생형위10%.결론:재간세포암조직중,HBV감염솔비상고,이차기핵심계동자구출현nt1762화nt1764쌍돌변솔교고,제시쌍돌변여간세포암관계밀절;동시본실험소건립적TDI-FP법조작쾌속간편,가이진행고통량자동화조작,구유진일보추엄응용적전경.
