解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2010年
6期
570-573
,共4页
袁丽丽%马登殿%杜红梅%孔佑华%张慧%任妍%郭岩
袁麗麗%馬登殿%杜紅梅%孔祐華%張慧%任妍%郭巖
원려려%마등전%두홍매%공우화%장혜%임연%곽암
Sd大鼠%皮质%神经干细胞%体外培养%促红细胞生成素
Sd大鼠%皮質%神經榦細胞%體外培養%促紅細胞生成素
Sd대서%피질%신경간세포%체외배양%촉홍세포생성소
目的 :检测体外培养SD大鼠胚脑皮质神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和分化的生物学特性,为NSCs研究提供适宜的细胞模型;探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对NSCs增殖的影响,为NSCs的相关研究提供实验依据.方法 :本研究对孕14d(E14)SD大鼠取鼠胚脑皮质悬浮培养、贴壁诱导分化.采用光电镜观察,以nestin免疫荧光染色鉴定NSCs,微管相关蛋白2(microtubule associated protein 2,MAP2)和神经胶质原纤维酸性蛋白(glia fibrillary acid protein,GFAP)检测NSCs分化.取第三代(P3)NSCs向悬浮培养基中添加不同剂量的EPO,通过四甲基偶氮唑蓝(MTr)检测法检测NSCs的增殖情况.结果 分离E14d SD大鼠胚脑皮质,在添加B27、bFGF、EGF的无血清培养基中培养,可形成大量悬浮的神经球并可进行体外扩增传代,神经球内的细胞均呈Nestin阳性、BrdU阳性.在添加10%胎牛血清的培养基中,神经干细胞可自然分化为神经元和神经胶质细胞.与对照组对比,加入≥5U/ml EPO后MTT检测NSCs OD值明显增高.结论 :SD大鼠胚脑皮质体外培养可得到大量增殖的神经干细胞并能分化为神经元和神经胶质细胞,EPO可促进体外NSCs的增殖.
目的 :檢測體外培養SD大鼠胚腦皮質神經榦細胞(neural stem cells,NSCs)增殖和分化的生物學特性,為NSCs研究提供適宜的細胞模型;探討促紅細胞生成素(erythropoietin,EPO)對NSCs增殖的影響,為NSCs的相關研究提供實驗依據.方法 :本研究對孕14d(E14)SD大鼠取鼠胚腦皮質懸浮培養、貼壁誘導分化.採用光電鏡觀察,以nestin免疫熒光染色鑒定NSCs,微管相關蛋白2(microtubule associated protein 2,MAP2)和神經膠質原纖維痠性蛋白(glia fibrillary acid protein,GFAP)檢測NSCs分化.取第三代(P3)NSCs嚮懸浮培養基中添加不同劑量的EPO,通過四甲基偶氮唑藍(MTr)檢測法檢測NSCs的增殖情況.結果 分離E14d SD大鼠胚腦皮質,在添加B27、bFGF、EGF的無血清培養基中培養,可形成大量懸浮的神經毬併可進行體外擴增傳代,神經毬內的細胞均呈Nestin暘性、BrdU暘性.在添加10%胎牛血清的培養基中,神經榦細胞可自然分化為神經元和神經膠質細胞.與對照組對比,加入≥5U/ml EPO後MTT檢測NSCs OD值明顯增高.結論 :SD大鼠胚腦皮質體外培養可得到大量增殖的神經榦細胞併能分化為神經元和神經膠質細胞,EPO可促進體外NSCs的增殖.
목적 :검측체외배양SD대서배뇌피질신경간세포(neural stem cells,NSCs)증식화분화적생물학특성,위NSCs연구제공괄의적세포모형;탐토촉홍세포생성소(erythropoietin,EPO)대NSCs증식적영향,위NSCs적상관연구제공실험의거.방법 :본연구대잉14d(E14)SD대서취서배뇌피질현부배양、첩벽유도분화.채용광전경관찰,이nestin면역형광염색감정NSCs,미관상관단백2(microtubule associated protein 2,MAP2)화신경효질원섬유산성단백(glia fibrillary acid protein,GFAP)검측NSCs분화.취제삼대(P3)NSCs향현부배양기중첨가불동제량적EPO,통과사갑기우담서람(MTr)검측법검측NSCs적증식정황.결과 분리E14d SD대서배뇌피질,재첨가B27、bFGF、EGF적무혈청배양기중배양,가형성대량현부적신경구병가진행체외확증전대,신경구내적세포균정Nestin양성、BrdU양성.재첨가10%태우혈청적배양기중,신경간세포가자연분화위신경원화신경효질세포.여대조조대비,가입≥5U/ml EPO후MTT검측NSCs OD치명현증고.결론 :SD대서배뇌피질체외배양가득도대량증식적신경간세포병능분화위신경원화신경효질세포,EPO가촉진체외NSCs적증식.
