重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
9期
881-883,887
,共4页
李学军%张灏%李永敢%孙碧红
李學軍%張灝%李永敢%孫碧紅
리학군%장호%리영감%손벽홍
转录启动子%质粒%转录调控%纤维蛋白原样蛋白%顺式作用元件
轉錄啟動子%質粒%轉錄調控%纖維蛋白原樣蛋白%順式作用元件
전록계동자%질립%전록조공%섬유단백원양단백%순식작용원건
目的 扩增人纤维蛋白原样蛋白2(hfgl2)凝血酶原酶基因5′端调控序列,构建荧光素酶报告基因表达载体,对hfgl2基因5′侧翼启动子序列进行生物信息学分析,预测可能的调控区域及顺式作用元件.方法 用聚合酶链反应(PCR)法从人外周血单个核细胞基因组DNA中扩增hfgl2凝血酶原酶基因5′端调控序列,PCR产物酶切后克隆至pGL3-Basic载体,重组质粒行酶切及测序鉴定,使用在线分析软件对5′端调控序列中的转录因子结合位点及启动子序列进行预测.结果 扩增了长度为1 567 bp的hfgl2凝血酶原酶基因5′端序列,酶切及测序鉴定证实构建的pGL3-hfgl2质粒插入片段正确无误,分析显示该基因序列共含有138个、31种顺式作用元件.结论 构建hfgl2基因近端启动子转录调控序列荧光素酶报告基因的表达载体为研究hfgl2的转录调控奠定了基础.
目的 擴增人纖維蛋白原樣蛋白2(hfgl2)凝血酶原酶基因5′耑調控序列,構建熒光素酶報告基因錶達載體,對hfgl2基因5′側翼啟動子序列進行生物信息學分析,預測可能的調控區域及順式作用元件.方法 用聚閤酶鏈反應(PCR)法從人外週血單箇覈細胞基因組DNA中擴增hfgl2凝血酶原酶基因5′耑調控序列,PCR產物酶切後剋隆至pGL3-Basic載體,重組質粒行酶切及測序鑒定,使用在線分析軟件對5′耑調控序列中的轉錄因子結閤位點及啟動子序列進行預測.結果 擴增瞭長度為1 567 bp的hfgl2凝血酶原酶基因5′耑序列,酶切及測序鑒定證實構建的pGL3-hfgl2質粒插入片段正確無誤,分析顯示該基因序列共含有138箇、31種順式作用元件.結論 構建hfgl2基因近耑啟動子轉錄調控序列熒光素酶報告基因的錶達載體為研究hfgl2的轉錄調控奠定瞭基礎.
목적 확증인섬유단백원양단백2(hfgl2)응혈매원매기인5′단조공서렬,구건형광소매보고기인표체재체,대hfgl2기인5′측익계동자서렬진행생물신식학분석,예측가능적조공구역급순식작용원건.방법 용취합매련반응(PCR)법종인외주혈단개핵세포기인조DNA중확증hfgl2응혈매원매기인5′단조공서렬,PCR산물매절후극륭지pGL3-Basic재체,중조질립행매절급측서감정,사용재선분석연건대5′단조공서렬중적전록인자결합위점급계동자서렬진행예측.결과 확증료장도위1 567 bp적hfgl2응혈매원매기인5′단서렬,매절급측서감정증실구건적pGL3-hfgl2질립삽입편단정학무오,분석현시해기인서렬공함유138개、31충순식작용원건.결론 구건hfgl2기인근단계동자전록조공서렬형광소매보고기인적표체재체위연구hfgl2적전록조공전정료기출.
