重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
6期
578-580,封4
,共4页
细胞转分化%转化生长因子β1%川芎嗪%人胚肾近端小管上皮细胞%肾间质纤维化
細胞轉分化%轉化生長因子β1%川芎嗪%人胚腎近耑小管上皮細胞%腎間質纖維化
세포전분화%전화생장인자β1%천궁진%인배신근단소관상피세포%신간질섬유화
目的 利用原代培养的人胚肾近端小管上皮细胞作为研究对象,探讨川芎嗪(TMP)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肾近端小管上皮细胞转分化的影响.方法 采用胶原酶消化后系列网筛过滤,再用密度梯度离心分离纯化细胞的方法,进行人胚肾近端小管上皮细胞的原代培养.原代培养的人胚肾近端小管上皮细胞传至第2代后分为5组,空白对照组、10 ng/mL TGF-β1刺激组、5 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激组、10 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激组及20 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激组.刺激48 h后,采用倒置相差显微镜、透射电子显微镜、酶化学染色和免疫细胞化学方法检测细胞的转分化情况.结果 TGF-β1刺激人胚肾近端小管上皮细胞后细胞拉长呈梭形,细胞间隙加大;电子显微镜下细胞失去极性,微绒毛减少直至消失;碱性磷酸酶染色阴性;细胞角蛋白18(CK-18)表达减弱,波形蛋白(Vimentin)表达增强,并表达α平滑肌肌动蛋白抗体(α-SMA).各浓度TMP+10 ng/mL TGF-β1刺激组细胞的上述变化均有不同程度的减弱,减弱程度与TMP浓度呈正比.结论 TMP能以浓度依赖方式阻止TGF-β1诱导的人胚肾近端小管上皮细胞的转分化.
目的 利用原代培養的人胚腎近耑小管上皮細胞作為研究對象,探討川芎嗪(TMP)對轉化生長因子β1(TGF-β1)誘導的人胚腎近耑小管上皮細胞轉分化的影響.方法 採用膠原酶消化後繫列網篩過濾,再用密度梯度離心分離純化細胞的方法,進行人胚腎近耑小管上皮細胞的原代培養.原代培養的人胚腎近耑小管上皮細胞傳至第2代後分為5組,空白對照組、10 ng/mL TGF-β1刺激組、5 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激組、10 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激組及20 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激組.刺激48 h後,採用倒置相差顯微鏡、透射電子顯微鏡、酶化學染色和免疫細胞化學方法檢測細胞的轉分化情況.結果 TGF-β1刺激人胚腎近耑小管上皮細胞後細胞拉長呈梭形,細胞間隙加大;電子顯微鏡下細胞失去極性,微絨毛減少直至消失;堿性燐痠酶染色陰性;細胞角蛋白18(CK-18)錶達減弱,波形蛋白(Vimentin)錶達增彊,併錶達α平滑肌肌動蛋白抗體(α-SMA).各濃度TMP+10 ng/mL TGF-β1刺激組細胞的上述變化均有不同程度的減弱,減弱程度與TMP濃度呈正比.結論 TMP能以濃度依賴方式阻止TGF-β1誘導的人胚腎近耑小管上皮細胞的轉分化.
목적 이용원대배양적인배신근단소관상피세포작위연구대상,탐토천궁진(TMP)대전화생장인자β1(TGF-β1)유도적인배신근단소관상피세포전분화적영향.방법 채용효원매소화후계렬망사과려,재용밀도제도리심분리순화세포적방법,진행인배신근단소관상피세포적원대배양.원대배양적인배신근단소관상피세포전지제2대후분위5조,공백대조조、10 ng/mL TGF-β1자격조、5 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1자격조、10 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1자격조급20 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1자격조.자격48 h후,채용도치상차현미경、투사전자현미경、매화학염색화면역세포화학방법검측세포적전분화정황.결과 TGF-β1자격인배신근단소관상피세포후세포랍장정사형,세포간극가대;전자현미경하세포실거겁성,미융모감소직지소실;감성린산매염색음성;세포각단백18(CK-18)표체감약,파형단백(Vimentin)표체증강,병표체α평활기기동단백항체(α-SMA).각농도TMP+10 ng/mL TGF-β1자격조세포적상술변화균유불동정도적감약,감약정도여TMP농도정정비.결론 TMP능이농도의뢰방식조지TGF-β1유도적인배신근단소관상피세포적전분화.
