CAJ | 학술논문

目的:检测肝癌干细胞标志CD133在化学诱导C57BL/6J小鼠肝癌过程中各时期的动态变化.方法:通过化学法[二乙基亚硝胺(diethylnirtosamine,DEN)/四氯化碳(carbon tetrachloride,CC14)/乙醇]诱发50只C57BL/6J雄性小鼠肝癌,对照组为45只正常C57BL/6J雄性小鼠.观察小鼠成瘤情况和生长状态,对每2周定期处死小鼠获得的组织标本分别进行病理学切片观察,并采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学法、蛋白质印迹法和FCM法分别检测CD133 mRNA和蛋白的表达情况.结果:化学诱导20周后,成功诱发出小鼠肝癌.实时荧光定量PCR和FCM检测结果显示,第8周后诱癌组小鼠肝组织中CD133的表达高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.001)；随着诱癌时间的增加,CD133的表达量呈上升趋势,第16周时诱癌组CD133的表达明显高于前期诱癌组(P＜0.001).蛋白质印迹法检测结果显示,诱癌组CD133蛋白从第4周起出现弱表达,随着诱癌时间的递增,CD133蛋白表达量逐渐增多.免疫组织化学检测结果显示,诱癌组第8周CD133出现弱阳性,第16周出现中等阳性,第20周出现强阳性；而正常对照组无表达.结论:肝癌干细胞标志CD133参与了肝癌的发生、发展全过程,随着诱癌进展其表达量逐渐增加.
목적:검측간암간세포표지CD133재화학유도C57BL/6J소서간암과정중각시기적동태변화.방법:통과화학법[이을기아초알(diethylnirtosamine,DEN)/사록화탄(carbon tetrachloride,CC14)/을순]유발50지C57BL/6J웅성소서간암,대조조위45지정상C57BL/6J웅성소서.관찰소서성류정황화생장상태,대매2주정기처사소서획득적조직표본분별진행병이학절편관찰,병채용실시형광정량PCR、면역조직화학법、단백질인적법화FCM법분별검측CD133 mRNA화단백적표체정황.결과:화학유도20주후,성공유발출소서간암.실시형광정량PCR화FCM검측결과현시,제8주후유암조소서간조직중CD133적표체고우정상대조조,차이유통계학의의(P＜ 0.05혹P＜0.001)；수착유암시간적증가,CD133적표체량정상승추세,제16주시유암조CD133적표체명현고우전기유암조(P＜0.001).단백질인적법검측결과현시,유암조CD133단백종제4주기출현약표체,수착유암시간적체증,CD133단백표체량축점증다.면역조직화학검측결과현시,유암조제8주CD133출현약양성,제16주출현중등양성,제20주출현강양성；이정상대조조무표체.결론:간암간세포표지CD133삼여료간암적발생、발전전과정,수착유암진전기표체량축점증가.