中华劳动卫生职业病杂志
中華勞動衛生職業病雜誌
중화노동위생직업병잡지
CHINESE JOURNAL OF INDUSTRIAL HYGIENE AND OCCUPATIONAL DISEASES
2006年
2期
77-80
,共4页
胡永斌%宗豫蓉%冯德云%金中元%蒋海鹰%彭劲武
鬍永斌%宗豫蓉%馮德雲%金中元%蔣海鷹%彭勁武
호영빈%종예용%풍덕운%금중원%장해응%팽경무
转化生长因子β%成纤维细胞%胶原Ⅰ型%基质金属蛋白酶
轉化生長因子β%成纖維細胞%膠原Ⅰ型%基質金屬蛋白酶
전화생장인자β%성섬유세포%효원Ⅰ형%기질금속단백매
目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在调控人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原表达、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活力中的作用.方法 以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10 ng/ml的TGF-β1刺激不同时间;阻断实验以P38激酶特异性抑制剂(SB203580)、ERK激酶特异性抑制剂(PD98059)分别阻断p38通路和细胞外调控激酶(ERK)通路;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内Ⅰ型胶原mRNA的表达;运用Western印迹检测细胞上清液中Ⅰ型胶原蛋白表达;酶谱分析细胞上清液中MMP-2、MMP-9的活力.结果 (1)TGF-β1刺激HLF-02细胞,24、48、72 h组的Ⅰ型胶原mRNA表达水平分别为1.33±0.07、2.46±0.09、2.39±0.08;Ⅰ型胶原蛋白表达水平分别为114.89±8.95、208.16±6.75、211.46±8.05;MMP-2的活力分别为190.33±5.86、214.33±8.39、212.67±11.59.(2)SB203580对TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原mRNA水平、蛋白水平及MMP-2活力的抑制率分别为51%、24%、20%.(3)PD98059对TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原mRNA水平、蛋白水平以及MMP-2活力的抑制率分别为42%、13%、16%.结论 TGF-β1可促进HLF-02细胞Ⅰ型胶原的转录和蛋白表达,上调MMP-2活力;p38、ERK激酶通路在此过程中具有重要的调控作用.
目的探討轉化生長因子β1(TGF-β1)/絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在調控人肺成纖維細胞Ⅰ型膠原錶達、基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)活力中的作用.方法 以人肺成纖維細胞HLF-02細胞繫為研究對象,給予10 ng/ml的TGF-β1刺激不同時間;阻斷實驗以P38激酶特異性抑製劑(SB203580)、ERK激酶特異性抑製劑(PD98059)分彆阻斷p38通路和細胞外調控激酶(ERK)通路;採用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測細胞內Ⅰ型膠原mRNA的錶達;運用Western印跡檢測細胞上清液中Ⅰ型膠原蛋白錶達;酶譜分析細胞上清液中MMP-2、MMP-9的活力.結果 (1)TGF-β1刺激HLF-02細胞,24、48、72 h組的Ⅰ型膠原mRNA錶達水平分彆為1.33±0.07、2.46±0.09、2.39±0.08;Ⅰ型膠原蛋白錶達水平分彆為114.89±8.95、208.16±6.75、211.46±8.05;MMP-2的活力分彆為190.33±5.86、214.33±8.39、212.67±11.59.(2)SB203580對TGF-β1誘導的Ⅰ型膠原mRNA水平、蛋白水平及MMP-2活力的抑製率分彆為51%、24%、20%.(3)PD98059對TGF-β1誘導的Ⅰ型膠原mRNA水平、蛋白水平以及MMP-2活力的抑製率分彆為42%、13%、16%.結論 TGF-β1可促進HLF-02細胞Ⅰ型膠原的轉錄和蛋白錶達,上調MMP-2活力;p38、ERK激酶通路在此過程中具有重要的調控作用.
목적탐토전화생장인자β1(TGF-β1)/사렬원활화단백격매(MAPK)통로재조공인폐성섬유세포Ⅰ형효원표체、기질금속단백매-2(MMP-2)、기질금속단백매-9(MMP-9)활력중적작용.방법 이인폐성섬유세포HLF-02세포계위연구대상,급여10 ng/ml적TGF-β1자격불동시간;조단실험이P38격매특이성억제제(SB203580)、ERK격매특이성억제제(PD98059)분별조단p38통로화세포외조공격매(ERK)통로;채용역전록취합매련반응(RT-PCR)검측세포내Ⅰ형효원mRNA적표체;운용Western인적검측세포상청액중Ⅰ형효원단백표체;매보분석세포상청액중MMP-2、MMP-9적활력.결과 (1)TGF-β1자격HLF-02세포,24、48、72 h조적Ⅰ형효원mRNA표체수평분별위1.33±0.07、2.46±0.09、2.39±0.08;Ⅰ형효원단백표체수평분별위114.89±8.95、208.16±6.75、211.46±8.05;MMP-2적활력분별위190.33±5.86、214.33±8.39、212.67±11.59.(2)SB203580대TGF-β1유도적Ⅰ형효원mRNA수평、단백수평급MMP-2활력적억제솔분별위51%、24%、20%.(3)PD98059대TGF-β1유도적Ⅰ형효원mRNA수평、단백수평이급MMP-2활력적억제솔분별위42%、13%、16%.결론 TGF-β1가촉진HLF-02세포Ⅰ형효원적전록화단백표체,상조MMP-2활력;p38、ERK격매통로재차과정중구유중요적조공작용.
