日本血吸虫组织蛋白酶L2(SjCL2)基因巴氏毕赤酵母表达载体的构建
일본혈흡충조직단백매L2(SjCL2)기인파씨필적효모표체재체적구건
Construction of the expression vector of Pichia pastoris yeast for the gene coding for proteinase cathepsin L2 of Schistosoma japonicum
  • 万方数据
    中国人兽共患病杂志 중국인수공환병잡지
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2004年 5期 390-393 ,共4页

    易冰%何蔼%雷智刚%郑小英%张瑞林%孟锦绣%申川军%李卓雅%詹希美

    역빙%하애%뢰지강%정소영%장서림%맹금수%신천군%리탁아%첨희미

    日本血吸虫%组织蛋白酶L2%基因克隆%巴氏毕赤酵母表达载体 日本血吸蟲%組織蛋白酶L2%基因剋隆%巴氏畢赤酵母錶達載體
    일본혈흡충%조직단백매L2%기인극륭%파씨필적효모표체재체
    目的扩增SjCL2基因,构建巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB-SjCL2,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础.方法运用RT-PCR技术,从日本血吸虫(中国大陆株)成虫总RNA中扩增获得SjCL2基因;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB质粒;经KpnⅠ、XbaⅠ双酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序分析SjCL2基因并确定其读码框的正确插入.结果利用RT-PCR技术从日本血吸虫成虫总RNA中扩增到约1Kb大小的SjCL2基因,通过双酶切分析、PCR鉴定以及DNA序列分析确定SjCL2基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB中.结论成功构建了含有SjCL2基因编码区序列的巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB-SjCL2质粒.
    목적확증SjCL2기인,구건파씨필적효모표체재체pPICZαB-SjCL2,위진일보연구기단백매적공능전정기출.방법운용RT-PCR기술,종일본혈흡충(중국대륙주)성충총RNA중확증획득SjCL2기인;장기정향극륭지파씨필적효모표체재체pPICZαB질립;경KpnⅠ、XbaⅠ쌍매절분석화PCR감정사선출양성극륭,측서분석SjCL2기인병학정기독마광적정학삽입.결과이용RT-PCR기술종일본혈흡충성충총RNA중확증도약1Kb대소적SjCL2기인,통과쌍매절분석、PCR감정이급DNA서렬분석학정SjCL2기인피극륭도파씨필적효모표체재체pPICZαB중.결론성공구건료함유SjCL2기인편마구서렬적파씨필적효모표체재체pPICZαB-SjCL2질립.
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