中国职业医学
中國職業醫學
중국직업의학
CHINA OCCUPATIONAL MEDICINE
2006年
6期
412-414,428
,共4页
陈嘉昌%李森华%彭瑾瑜%付艳艳%叶伟超%常弘
陳嘉昌%李森華%彭瑾瑜%付豔豔%葉偉超%常弘
진가창%리삼화%팽근유%부염염%협위초%상홍
β-肌动蛋白%加工后假基因%基因表达分析%反转录聚合酶链反应
β-肌動蛋白%加工後假基因%基因錶達分析%反轉錄聚閤酶鏈反應
β-기동단백%가공후가기인%기인표체분석%반전록취합매련반응
目的 筛选合适的β-肌动蛋白(β-actin)引物以排除RNA样本中残存的DNA对人类基因表达分析的干扰.方法 利用EMBL、PSEUDOGENE等生物信息数据库,寻找β-actin的假基因.同时自行设计和从国内外文献中筛选了众多β-actin引物.选用其中具有代表性的5对跨过内含子的引物,分别将基因组DNA、未经逆转录的RNA、cDNA作为模板,对这5对引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增.结果 生物信息学分析发现β-actin有37个假基因并且发现绝大多数的研究者所使用的引物都存在假基因干扰问题.当分别用DNA和cDNA作为模板时,5对引物中的1对跨过内含子的引物能扩增出大小不同的条带.结论 使用该对引物能有效发现和排除RNA样本中所残存的DNA的干扰,令人类基因表达分析得出更准确的结果.
目的 篩選閤適的β-肌動蛋白(β-actin)引物以排除RNA樣本中殘存的DNA對人類基因錶達分析的榦擾.方法 利用EMBL、PSEUDOGENE等生物信息數據庫,尋找β-actin的假基因.同時自行設計和從國內外文獻中篩選瞭衆多β-actin引物.選用其中具有代錶性的5對跨過內含子的引物,分彆將基因組DNA、未經逆轉錄的RNA、cDNA作為模闆,對這5對引物進行聚閤酶鏈反應(PCR)擴增.結果 生物信息學分析髮現β-actin有37箇假基因併且髮現絕大多數的研究者所使用的引物都存在假基因榦擾問題.噹分彆用DNA和cDNA作為模闆時,5對引物中的1對跨過內含子的引物能擴增齣大小不同的條帶.結論 使用該對引物能有效髮現和排除RNA樣本中所殘存的DNA的榦擾,令人類基因錶達分析得齣更準確的結果.
목적 사선합괄적β-기동단백(β-actin)인물이배제RNA양본중잔존적DNA대인류기인표체분석적간우.방법 이용EMBL、PSEUDOGENE등생물신식수거고,심조β-actin적가기인.동시자행설계화종국내외문헌중사선료음다β-actin인물.선용기중구유대표성적5대과과내함자적인물,분별장기인조DNA、미경역전록적RNA、cDNA작위모판,대저5대인물진행취합매련반응(PCR)확증.결과 생물신식학분석발현β-actin유37개가기인병차발현절대다수적연구자소사용적인물도존재가기인간우문제.당분별용DNA화cDNA작위모판시,5대인물중적1대과과내함자적인물능확증출대소불동적조대.결론 사용해대인물능유효발현화배제RNA양본중소잔존적DNA적간우,령인류기인표체분석득출경준학적결과.
