第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2007年
8期
894-897
,共4页
张双民%张莉滟%刘稳升%吕志跃%郑焕钦%吴忠道
張雙民%張莉滟%劉穩升%呂誌躍%鄭煥欽%吳忠道
장쌍민%장리염%류은승%려지약%정환흠%오충도
血吸虫,日本%膜蛋白质类%生物信息学%克隆,分子
血吸蟲,日本%膜蛋白質類%生物信息學%剋隆,分子
혈흡충,일본%막단백질류%생물신식학%극륭,분자
目的:筛选日本血吸虫可能的特异性膜蛋白,并根据筛选结果在日本血吸虫成虫中尝试克隆某一可能具有免疫保护功能的预测蛋白的编码序列,为血吸虫病防治研究寻找新的疫苗候选分子或药物靶标.方法:以"Schistosoma japonicum"和"membrane or tegument"为关键词,在公共数据库NCBI进行查找并下载数据,建立本地化的日本血吸虫膜蛋白序列数据库,与本实验室建立的曼氏血吸虫、人类、大鼠及小鼠蛋白质数据库等进行多序列比对,筛选日本血吸虫特异性膜蛋白,同时通过CBS网站相应分析工具软件预测目的蛋白的特征和功能.针对其中可能有免疫保护功能的预测蛋白的预测编码序列设计引物,采用RT-PCR技术从日本血吸虫成虫中扩增出该编码序列,并克隆入pGEX-4T-1构建原核表达重组质粒.结果:共检索到153个理论推测的日本血吸虫膜蛋白序列,筛选出28个可能的日本血吸虫特异性膜蛋白;成功从日本血吸虫成虫中扩增出相对分子质量为15 000的预测蛋白的预测编码序列,暂命名为sj15基因,同时成功构建pGEX-4T-1-sj15重组质粒.结论:成功筛选出多个日本血吸虫特异性膜蛋白;从日本血吸虫成虫中成功克隆出GenBank公布的预测的sj15基因,证实了成虫中该预测基因的存在,并成功构建原核表达载体,为进一步的功能研究奠定了基础.
目的:篩選日本血吸蟲可能的特異性膜蛋白,併根據篩選結果在日本血吸蟲成蟲中嘗試剋隆某一可能具有免疫保護功能的預測蛋白的編碼序列,為血吸蟲病防治研究尋找新的疫苗候選分子或藥物靶標.方法:以"Schistosoma japonicum"和"membrane or tegument"為關鍵詞,在公共數據庫NCBI進行查找併下載數據,建立本地化的日本血吸蟲膜蛋白序列數據庫,與本實驗室建立的曼氏血吸蟲、人類、大鼠及小鼠蛋白質數據庫等進行多序列比對,篩選日本血吸蟲特異性膜蛋白,同時通過CBS網站相應分析工具軟件預測目的蛋白的特徵和功能.針對其中可能有免疫保護功能的預測蛋白的預測編碼序列設計引物,採用RT-PCR技術從日本血吸蟲成蟲中擴增齣該編碼序列,併剋隆入pGEX-4T-1構建原覈錶達重組質粒.結果:共檢索到153箇理論推測的日本血吸蟲膜蛋白序列,篩選齣28箇可能的日本血吸蟲特異性膜蛋白;成功從日本血吸蟲成蟲中擴增齣相對分子質量為15 000的預測蛋白的預測編碼序列,暫命名為sj15基因,同時成功構建pGEX-4T-1-sj15重組質粒.結論:成功篩選齣多箇日本血吸蟲特異性膜蛋白;從日本血吸蟲成蟲中成功剋隆齣GenBank公佈的預測的sj15基因,證實瞭成蟲中該預測基因的存在,併成功構建原覈錶達載體,為進一步的功能研究奠定瞭基礎.
목적:사선일본혈흡충가능적특이성막단백,병근거사선결과재일본혈흡충성충중상시극륭모일가능구유면역보호공능적예측단백적편마서렬,위혈흡충병방치연구심조신적역묘후선분자혹약물파표.방법:이"Schistosoma japonicum"화"membrane or tegument"위관건사,재공공수거고NCBI진행사조병하재수거,건립본지화적일본혈흡충막단백서렬수거고,여본실험실건립적만씨혈흡충、인류、대서급소서단백질수거고등진행다서렬비대,사선일본혈흡충특이성막단백,동시통과CBS망참상응분석공구연건예측목적단백적특정화공능.침대기중가능유면역보호공능적예측단백적예측편마서렬설계인물,채용RT-PCR기술종일본혈흡충성충중확증출해편마서렬,병극륭입pGEX-4T-1구건원핵표체중조질립.결과:공검색도153개이론추측적일본혈흡충막단백서렬,사선출28개가능적일본혈흡충특이성막단백;성공종일본혈흡충성충중확증출상대분자질량위15 000적예측단백적예측편마서렬,잠명명위sj15기인,동시성공구건pGEX-4T-1-sj15중조질립.결론:성공사선출다개일본혈흡충특이성막단백;종일본혈흡충성충중성공극륭출GenBank공포적예측적sj15기인,증실료성충중해예측기인적존재,병성공구건원핵표체재체,위진일보적공능연구전정료기출.
