江苏医药
江囌醫藥
강소의약
JIANGSU MEDICAL JOURNAL
2008年
3期
254-256
,共3页
周晓彤%沈振亚%于曙东%余云生%叶文学%黄浩岳%焦鹏%滕小梅
週曉彤%瀋振亞%于曙東%餘雲生%葉文學%黃浩嶽%焦鵬%滕小梅
주효동%침진아%우서동%여운생%협문학%황호악%초붕%등소매
血管瘤内皮细胞%基因转染%阳离子脂质体%阳离子聚合物%细胞毒性
血管瘤內皮細胞%基因轉染%暘離子脂質體%暘離子聚閤物%細胞毒性
혈관류내피세포%기인전염%양리자지질체%양리자취합물%세포독성
目的 从三种常用的阳离子转染试剂中筛选出对小鼠血管瘤内皮细胞(EOMA)有较高转染效率和较低细胞毒性的转染试剂.方法 以含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1为报告基因,以阳离子脂质体LipofectamineTM2000、LipofectamineTM PLUS和阳离子聚合物JetPEITM为转染试剂,按照转染试剂盒的说明优化其转染条件,分别转染EOMA细胞,24 h后在荧光显微镜下计数阳性细胞率、MTT法检测各转染条件下对EOMA的细胞毒性.结果 经优化转染条件,LipofectamineTM PLUS和JetPEITM转染的细胞中阳性细胞的最高比例分别为45%和47%,LipofectamineTM2000转染的细胞中荧光蛋白表达的比例最高(＞80%),Lipofecta-mineTM2000试剂在最高转染效率的剂量下仍然保证了80%的细胞存活率.结论 阳离子脂质体LipofectamineTM2000对小鼠EOMA细胞有较高的转染效率和较低的细胞毒作用.
目的 從三種常用的暘離子轉染試劑中篩選齣對小鼠血管瘤內皮細胞(EOMA)有較高轉染效率和較低細胞毒性的轉染試劑.方法 以含有增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)報告基因的真覈錶達載體pEGFP-N1為報告基因,以暘離子脂質體LipofectamineTM2000、LipofectamineTM PLUS和暘離子聚閤物JetPEITM為轉染試劑,按照轉染試劑盒的說明優化其轉染條件,分彆轉染EOMA細胞,24 h後在熒光顯微鏡下計數暘性細胞率、MTT法檢測各轉染條件下對EOMA的細胞毒性.結果 經優化轉染條件,LipofectamineTM PLUS和JetPEITM轉染的細胞中暘性細胞的最高比例分彆為45%和47%,LipofectamineTM2000轉染的細胞中熒光蛋白錶達的比例最高(＞80%),Lipofecta-mineTM2000試劑在最高轉染效率的劑量下仍然保證瞭80%的細胞存活率.結論 暘離子脂質體LipofectamineTM2000對小鼠EOMA細胞有較高的轉染效率和較低的細胞毒作用.
목적 종삼충상용적양리자전염시제중사선출대소서혈관류내피세포(EOMA)유교고전염효솔화교저세포독성적전염시제.방법 이함유증강형록색형광단백(EGFP)보고기인적진핵표체재체pEGFP-N1위보고기인,이양리자지질체LipofectamineTM2000、LipofectamineTM PLUS화양리자취합물JetPEITM위전염시제,안조전염시제합적설명우화기전염조건,분별전염EOMA세포,24 h후재형광현미경하계수양성세포솔、MTT법검측각전염조건하대EOMA적세포독성.결과 경우화전염조건,LipofectamineTM PLUS화JetPEITM전염적세포중양성세포적최고비례분별위45%화47%,LipofectamineTM2000전염적세포중형광단백표체적비례최고(＞80%),Lipofecta-mineTM2000시제재최고전염효솔적제량하잉연보증료80%적세포존활솔.결론 양리자지질체LipofectamineTM2000대소서EOMA세포유교고적전염효솔화교저적세포독작용.
