Nodal蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备
Nodal단백적표체、순화급다극륭항체제비
Expression, Purification of Nodal Fusion Protein and Preparation of Its Polyclonal Antibody
  • 万方数据
    激光生物学报 격광생물학보
    ACTA LASER BIOLOGY SINICA
    2010年 6期 813-816 ,共4页

    宋怀婷%梁洁%莫小阳%邓云%万永奇%李永青%袁婺洲%江志钢%吴秀山%王跃群

    송부정%량길%막소양%산운%만영기%리영청%원무주%강지강%오수산%왕약군

    Nodal%融合蛋白%多克隆抗体 Nodal%融閤蛋白%多剋隆抗體
    Nodal%융합단백%다극륭항체
    斑马鱼心脏发育模型中Nodal编码转录因子调节心脏的左右不对称发育,为了进一步研究Nodal信号途径在心脏发育中的调控作用和心脏疾病发生的分子机制,需要获得斑马鱼Nodal蛋白并制备其抗体.采用从斑马鱼心脏组织中提取RNA,通过反转录得到心脏组织各种表达基因的cDNA为模板,PCR扩增得到Nodal部分编码区序列,然后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达.经酶切及测序鉴定后,转化Rosseta细菌,并用IPTG诱导表达融合蛋白,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体.获得了Nodal原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Nodal多克隆抗体,为Nodal功能的进一步研究奠定了基础.
    반마어심장발육모형중Nodal편마전록인자조절심장적좌우불대칭발육,위료진일보연구Nodal신호도경재심장발육중적조공작용화심장질병발생적분자궤제,수요획득반마어Nodal단백병제비기항체.채용종반마어심장조직중제취RNA,통과반전록득도심장조직각충표체기인적cDNA위모판,PCR확증득도Nodal부분편마구서렬,연후장기련접도pET-28a재체상획득원핵표체.경매절급측서감정후,전화Rosseta세균,병용IPTG유도표체융합단백,Ni-IDA응효주친화순화,장순화적융합단백면역신서란대백토제비다극륭항체,병용Western blotting검측항체.획득료Nodal원핵표체중조융합단백급고효개적특이성토항Nodal다극륭항체,위Nodal공능적진일보연구전정료기출.
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