CAJ | 학술논문

目的从中华眼镜蛇粗毒中分离纯化其α-神经毒组分,并将此α-神经毒作为亲和层析的配基纯化烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR).方法采用凝胶过滤层析、阳离子交换层析逐步分离纯化中华眼镜蛇粗毒,通过125Ⅰ-α-银环蛇毒素(αBtx)-nAChR结合抑制实验检测蛋白活性、SDS-PAGE检测蛋白的相对分子质量和纯度；亲和层析纯化nAChR,放射免疫沉淀法测nAChR活性.结果从5g中华眼镜蛇粗毒中共纯化得到约20 mg眼镜蛇α-神经毒,该眼镜蛇α-神经毒有一定的125Ⅰ-αBtx-nAChR结合抑制活性,其半数抑制浓度(IC50)约为αBtx的28倍.以纯化的α-神经毒制备的亲和介质,可吸附大鼠骨骼肌肌膜提取物中约84％的125Ⅰ-αBtx结合活性,且此活性可以被0.2 mol/L卡巴胆碱洗脱.结论用简单的液相色谱方法可从中华眼镜蛇毒中分离纯化α-神经毒,并且可以以其为配体从大鼠骨骼肌中纯化nAChR.
목적 종중화안경사조독중분리순화기α-신경독조분,병장차α-신경독작위친화층석적배기순화연감형을선담감수체(nAChR).방법 채용응효과려층석、양리자교환층석축보분리순화중화안경사조독,통과125Ⅰ-α-은배사독소(αBtx)-nAChR결합억제실험검측단백활성、SDS-PAGE검측단백적상대분자질량화순도；친화층석순화nAChR,방사면역침정법측nAChR활성.결과 종5g중화안경사조독중공순화득도약20 mg안경사α-신경독,해안경사α-신경독유일정적125Ⅰ-αBtx-nAChR결합억제활성,기반수억제농도(IC50)약위αBtx적28배.이순화적α-신경독제비적친화개질,가흡부대서골격기기막제취물중약84％적125Ⅰ-αBtx결합활성,차차활성가이피0.2 mol/L잡파담감세탈.결론 용간단적액상색보방법가종중화안경사독중분리순화α-신경독,병차가이이기위배체종대서골격기중순화nAChR.