中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2007年
8期
679-682
,共4页
董胜利%赵浩亮%李高朋%贺杰峰
董勝利%趙浩亮%李高朋%賀傑峰
동성리%조호량%리고붕%하걸봉
反义肽核酸%树突状细胞%趋化因子受体%凋亡%Akt
反義肽覈痠%樹突狀細胞%趨化因子受體%凋亡%Akt
반의태핵산%수돌상세포%추화인자수체%조망%Akt
目的 研究靶向趋化因子受体CCR7的反义肽核酸(PNA)对树突状细胞(DC)CCR7蛋白表达及凋亡的影响,并探讨其凋亡机制.方法 体外培养大鼠骨髓来源的DC,脂多糖(LPS)诱导成熟.设计靶向CCR7 mRNA翻译起始区的反义PNA,以随机PNA和空白组为对照处理体外培养7 d的未成熟DC,脂多糖诱导48 h后收集成熟DC,免疫细胞化学染色法检测CCR7蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测磷酸化Akt和Akt蛋白表达.应用渥曼青霉素(wortmannin)抑制磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt信号通路进一步观察磷酸化Akt蛋白表达和细胞凋亡率的变化.结果 反义PNA组DC CCR7蛋白表达明显低于随机PNA组和空白组,而细胞凋亡率却明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05),Western blot检测显示反义PNA组Akt蛋白磷酸化水平明显低于随机PNA组和空白组,差异有统计学意义(P＜0.05).DC经PI3K抑制剂预处理后,CCR7介导的Akt蛋白磷酸化及抗凋亡作用被阻断.结论 CCR7反义PNA能够有效抑制体外培养的大鼠DC趋化因子受体CCR7的表达并导致其发生凋亡,其机制可能是阻断了CCR7介导PI3K/Akt信号转导通路的活化.
目的 研究靶嚮趨化因子受體CCR7的反義肽覈痠(PNA)對樹突狀細胞(DC)CCR7蛋白錶達及凋亡的影響,併探討其凋亡機製.方法 體外培養大鼠骨髓來源的DC,脂多糖(LPS)誘導成熟.設計靶嚮CCR7 mRNA翻譯起始區的反義PNA,以隨機PNA和空白組為對照處理體外培養7 d的未成熟DC,脂多糖誘導48 h後收集成熟DC,免疫細胞化學染色法檢測CCR7蛋白錶達,流式細胞術檢測細胞凋亡率,Western blot檢測燐痠化Akt和Akt蛋白錶達.應用渥曼青黴素(wortmannin)抑製燐脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt信號通路進一步觀察燐痠化Akt蛋白錶達和細胞凋亡率的變化.結果 反義PNA組DC CCR7蛋白錶達明顯低于隨機PNA組和空白組,而細胞凋亡率卻明顯增高,差異有統計學意義(P＜0.05),Western blot檢測顯示反義PNA組Akt蛋白燐痠化水平明顯低于隨機PNA組和空白組,差異有統計學意義(P＜0.05).DC經PI3K抑製劑預處理後,CCR7介導的Akt蛋白燐痠化及抗凋亡作用被阻斷.結論 CCR7反義PNA能夠有效抑製體外培養的大鼠DC趨化因子受體CCR7的錶達併導緻其髮生凋亡,其機製可能是阻斷瞭CCR7介導PI3K/Akt信號轉導通路的活化.
목적 연구파향추화인자수체CCR7적반의태핵산(PNA)대수돌상세포(DC)CCR7단백표체급조망적영향,병탐토기조망궤제.방법 체외배양대서골수래원적DC,지다당(LPS)유도성숙.설계파향CCR7 mRNA번역기시구적반의PNA,이수궤PNA화공백조위대조처리체외배양7 d적미성숙DC,지다당유도48 h후수집성숙DC,면역세포화학염색법검측CCR7단백표체,류식세포술검측세포조망솔,Western blot검측린산화Akt화Akt단백표체.응용악만청매소(wortmannin)억제린지선기순-3격매(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt신호통로진일보관찰린산화Akt단백표체화세포조망솔적변화.결과 반의PNA조DC CCR7단백표체명현저우수궤PNA조화공백조,이세포조망솔각명현증고,차이유통계학의의(P＜0.05),Western blot검측현시반의PNA조Akt단백린산화수평명현저우수궤PNA조화공백조,차이유통계학의의(P＜0.05).DC경PI3K억제제예처리후,CCR7개도적Akt단백린산화급항조망작용피조단.결론 CCR7반의PNA능구유효억제체외배양적대서DC추화인자수체CCR7적표체병도치기발생조망,기궤제가능시조단료CCR7개도PI3K/Akt신호전도통로적활화.
