中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2003年
1期
21-26
,共6页
耿念慈%殷凤仪%邱俊棠%芮特黎%王长君
耿唸慈%慇鳳儀%邱俊棠%芮特黎%王長君
경념자%은봉의%구준당%예특려%왕장군
HIV-1%CD4%基因,调节%免疫组织化学
HIV-1%CD4%基因,調節%免疫組織化學
HIV-1%CD4%기인,조절%면역조직화학
目的探讨HIV-1蛋白质Nef及Vpu对于CD4分子作用的机制及其相关位置的变化.方法转染CD4, Vpu, Nef等蛋白质T-细胞株、Jurkat或HPBALL细胞,作包埋前或包埋后间接免疫组织化学染色、双重免疫染色,并以半定量法分析Nef或Vpu在细胞中的表达.结果在表达Vpu的Jurkat与HPBALL细胞表面及细胞质中,CD4较不表达Vpu的细胞少.在细胞表面表达Nef的细胞中,CD4较不表达Nef的细胞少.而在细胞质,不表达Nef的Jurkat与HPBALL细胞中,CD4数目比表现Nef的细胞少.共聚焦显微镜双重染色观察分析,显示部分的Vpu和Gag在细胞中具有共同的位置,而Gag分子组装到病毒颗粒时并不受Vpu或Nef存在与否的影响.另外,在细胞质中并没有发现CD4-Vpu的复合体.结论 CD4分子直接与Nef接合并形成CD4-Nef复合体.此外,不论有无Vpu存在,当细胞表现Nef时,在细胞表面的被膜小凹上CD4-Nef复合体的形成,可能是加强CD4分子数目的调降机制中重要的一环.
目的探討HIV-1蛋白質Nef及Vpu對于CD4分子作用的機製及其相關位置的變化.方法轉染CD4, Vpu, Nef等蛋白質T-細胞株、Jurkat或HPBALL細胞,作包埋前或包埋後間接免疫組織化學染色、雙重免疫染色,併以半定量法分析Nef或Vpu在細胞中的錶達.結果在錶達Vpu的Jurkat與HPBALL細胞錶麵及細胞質中,CD4較不錶達Vpu的細胞少.在細胞錶麵錶達Nef的細胞中,CD4較不錶達Nef的細胞少.而在細胞質,不錶達Nef的Jurkat與HPBALL細胞中,CD4數目比錶現Nef的細胞少.共聚焦顯微鏡雙重染色觀察分析,顯示部分的Vpu和Gag在細胞中具有共同的位置,而Gag分子組裝到病毒顆粒時併不受Vpu或Nef存在與否的影響.另外,在細胞質中併沒有髮現CD4-Vpu的複閤體.結論 CD4分子直接與Nef接閤併形成CD4-Nef複閤體.此外,不論有無Vpu存在,噹細胞錶現Nef時,在細胞錶麵的被膜小凹上CD4-Nef複閤體的形成,可能是加彊CD4分子數目的調降機製中重要的一環.
목적탐토HIV-1단백질Nef급Vpu대우CD4분자작용적궤제급기상관위치적변화.방법전염CD4, Vpu, Nef등단백질T-세포주、Jurkat혹HPBALL세포,작포매전혹포매후간접면역조직화학염색、쌍중면역염색,병이반정량법분석Nef혹Vpu재세포중적표체.결과재표체Vpu적Jurkat여HPBALL세포표면급세포질중,CD4교불표체Vpu적세포소.재세포표면표체Nef적세포중,CD4교불표체Nef적세포소.이재세포질,불표체Nef적Jurkat여HPBALL세포중,CD4수목비표현Nef적세포소.공취초현미경쌍중염색관찰분석,현시부분적Vpu화Gag재세포중구유공동적위치,이Gag분자조장도병독과립시병불수Vpu혹Nef존재여부적영향.령외,재세포질중병몰유발현CD4-Vpu적복합체.결론 CD4분자직접여Nef접합병형성CD4-Nef복합체.차외,불론유무Vpu존재,당세포표현Nef시,재세포표면적피막소요상CD4-Nef복합체적형성,가능시가강CD4분자수목적조강궤제중중요적일배.