江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
5期
1069-1073
,共5页
车巧林%熊祺琰%冯志新%张旭%刘茂军%邵国青
車巧林%熊祺琰%馮誌新%張旭%劉茂軍%邵國青
차교림%웅기염%풍지신%장욱%류무군%소국청
猪肺炎支原体%黏附%间接免疫荧光
豬肺炎支原體%黏附%間接免疫熒光
저폐염지원체%점부%간접면역형광
为了建立一种用间接免疫荧光技术检测猪肺炎支原体黏附宿主细胞的方法.以抗猪肺炎支原体单克隆抗体为一抗,异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗小鼠IgG为二抗,通过对一抗、二抗工作浓度的优化确定合适的抗体浓度;通过以1×107 CCU/ml猪肺炎支原体与PK15细胞作用不同时间,确定其黏附细胞需要的时间;通过不同滴度的猪肺炎支原体与PK15细胞37℃作用4h,确定其黏附细胞需要的滴度.猪肺炎支原体单克隆抗体P463G11的最适工作浓度为1∶1000倍稀释,FITC-羊抗小鼠IgG的最适工作浓度为1∶200倍稀释,猪肺炎支原体黏附PK15细胞需要的时间为4h以上,黏附PK15细胞需要的滴度为1×105 CCU/ml以上.表明间接免疫荧光技术可以用来检测猪肺炎支原体对宿主细胞的黏附作用.
為瞭建立一種用間接免疫熒光技術檢測豬肺炎支原體黏附宿主細胞的方法.以抗豬肺炎支原體單剋隆抗體為一抗,異硫氰痠熒光素(FITC)標記的羊抗小鼠IgG為二抗,通過對一抗、二抗工作濃度的優化確定閤適的抗體濃度;通過以1×107 CCU/ml豬肺炎支原體與PK15細胞作用不同時間,確定其黏附細胞需要的時間;通過不同滴度的豬肺炎支原體與PK15細胞37℃作用4h,確定其黏附細胞需要的滴度.豬肺炎支原體單剋隆抗體P463G11的最適工作濃度為1∶1000倍稀釋,FITC-羊抗小鼠IgG的最適工作濃度為1∶200倍稀釋,豬肺炎支原體黏附PK15細胞需要的時間為4h以上,黏附PK15細胞需要的滴度為1×105 CCU/ml以上.錶明間接免疫熒光技術可以用來檢測豬肺炎支原體對宿主細胞的黏附作用.
위료건립일충용간접면역형광기술검측저폐염지원체점부숙주세포적방법.이항저폐염지원체단극륭항체위일항,이류청산형광소(FITC)표기적양항소서IgG위이항,통과대일항、이항공작농도적우화학정합괄적항체농도;통과이1×107 CCU/ml저폐염지원체여PK15세포작용불동시간,학정기점부세포수요적시간;통과불동적도적저폐염지원체여PK15세포37℃작용4h,학정기점부세포수요적적도.저폐염지원체단극륭항체P463G11적최괄공작농도위1∶1000배희석,FITC-양항소서IgG적최괄공작농도위1∶200배희석,저폐염지원체점부PK15세포수요적시간위4h이상,점부PK15세포수요적적도위1×105 CCU/ml이상.표명간접면역형광기술가이용래검측저폐염지원체대숙주세포적점부작용.
