中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2012年
5期
421-424
,共4页
登革病毒%E蛋白%大肠杆菌%基因表达
登革病毒%E蛋白%大腸桿菌%基因錶達
등혁병독%E단백%대장간균%기인표체
目的 利用大肠杆菌表达登革病毒2型外膜蛋白,获得重组抗原应用于血清学检测.方法 用RT-PCR法扩增登革2型病毒去除C端100个氨基酸的外膜蛋白基因片段,与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白用电洗脱法进行纯化.纯化的重组蛋白用间接ELISA法检测登革2型感染者血清,检测结果 与间接免疫荧光法、澳大利亚Panbio试剂进行比较.结果 重组质粒构建成功,经IPTG诱导后在大肠杆菌中表达重组蛋白.纯化的重组蛋白用于检测登革2型感染者血清,以IFTA作为参照标准,其敏感性为95.6%,特异性为96.8%.与澳大利亚Panbio IgG捕获法ELISA试剂盒检测结果 相比,两种方法 对登革2型IgG的检出率无统计学意义(P>0.05).结论 成功通过大肠杆菌表达登革2型去除C端疏水区的外膜蛋白,重组抗原可应用于血清学检测.
目的 利用大腸桿菌錶達登革病毒2型外膜蛋白,穫得重組抗原應用于血清學檢測.方法 用RT-PCR法擴增登革2型病毒去除C耑100箇氨基痠的外膜蛋白基因片段,與錶達載體pET-30a連接,構建重組錶達載體,在大腸桿菌BL21(DE3)中錶達,重組蛋白用電洗脫法進行純化.純化的重組蛋白用間接ELISA法檢測登革2型感染者血清,檢測結果 與間接免疫熒光法、澳大利亞Panbio試劑進行比較.結果 重組質粒構建成功,經IPTG誘導後在大腸桿菌中錶達重組蛋白.純化的重組蛋白用于檢測登革2型感染者血清,以IFTA作為參照標準,其敏感性為95.6%,特異性為96.8%.與澳大利亞Panbio IgG捕穫法ELISA試劑盒檢測結果 相比,兩種方法 對登革2型IgG的檢齣率無統計學意義(P>0.05).結論 成功通過大腸桿菌錶達登革2型去除C耑疏水區的外膜蛋白,重組抗原可應用于血清學檢測.
목적 이용대장간균표체등혁병독2형외막단백,획득중조항원응용우혈청학검측.방법 용RT-PCR법확증등혁2형병독거제C단100개안기산적외막단백기인편단,여표체재체pET-30a련접,구건중조표체재체,재대장간균BL21(DE3)중표체,중조단백용전세탈법진행순화.순화적중조단백용간접ELISA법검측등혁2형감염자혈청,검측결과 여간접면역형광법、오대리아Panbio시제진행비교.결과 중조질립구건성공,경IPTG유도후재대장간균중표체중조단백.순화적중조단백용우검측등혁2형감염자혈청,이IFTA작위삼조표준,기민감성위95.6%,특이성위96.8%.여오대리아Panbio IgG포획법ELISA시제합검측결과 상비,량충방법 대등혁2형IgG적검출솔무통계학의의(P>0.05).결론 성공통과대장간균표체등혁2형거제C단소수구적외막단백,중조항원가응용우혈청학검측.
