中国美容医学
中國美容醫學
중국미용의학
CHINESE JOURNAL OF AESTHETIC MEDICINE
2011年
z1期
73-74
,共2页
田力%田晓晔%梁晓鹏%于鑫琛%田晶
田力%田曉曄%樑曉鵬%于鑫琛%田晶
전력%전효엽%량효붕%우흠침%전정
骨髓间充质干细胞%血管内皮细胞生长因子%基因转染%成骨
骨髓間充質榦細胞%血管內皮細胞生長因子%基因轉染%成骨
골수간충질간세포%혈관내피세포생장인자%기인전염%성골
目的:血管内皮细胞生长因子在血管再生和骨组织再生过程中起着重要的调节作用.观察hVEGF-165基因转染的兔骨髓间充质干细胞分泌VEGF的功能及转染后细胞的成骨活性.方法:(1)体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,纯化并鉴定兔骨髓间充质干细胞;免疫荧光法检测细胞表面标志;传代培养后以1μgPcDNA3.1-hVEGF165∶3μL阳离子脂质体Lipofectamine的比例转染,通过ELISA和Western-blot检测转染后细胞中外源性VEGF的表达.(2)测定在正常条件培养和成骨条件培养下,转染后细胞上清中碱性磷酸酶、骨钙素的水平.结果:(1)hVEGF165基因转染的骨髓间充质干细胞能成功分泌VEGF蛋白.(2)成骨条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的分泌量明显高于未转染组(P<0 05);而在正常条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的表达分泌量较低.结论:(1)采用基因转染技术可将hVEGF165基因转染到骨髓间充质干细胞中并可有效表达具有生物活性的VEGF.(2)在成骨条件培养下,转染hVEGF165基因后骨髓间充质干细胞的成骨能力增强.
目的:血管內皮細胞生長因子在血管再生和骨組織再生過程中起著重要的調節作用.觀察hVEGF-165基因轉染的兔骨髓間充質榦細胞分泌VEGF的功能及轉染後細胞的成骨活性.方法:(1)體外分離、培養兔骨髓間充質榦細胞,純化併鑒定兔骨髓間充質榦細胞;免疫熒光法檢測細胞錶麵標誌;傳代培養後以1μgPcDNA3.1-hVEGF165∶3μL暘離子脂質體Lipofectamine的比例轉染,通過ELISA和Western-blot檢測轉染後細胞中外源性VEGF的錶達.(2)測定在正常條件培養和成骨條件培養下,轉染後細胞上清中堿性燐痠酶、骨鈣素的水平.結果:(1)hVEGF165基因轉染的骨髓間充質榦細胞能成功分泌VEGF蛋白.(2)成骨條件培養下,基因轉染組細胞堿性燐痠酶和骨鈣素的分泌量明顯高于未轉染組(P<0 05);而在正常條件培養下,基因轉染組細胞堿性燐痠酶和骨鈣素的錶達分泌量較低.結論:(1)採用基因轉染技術可將hVEGF165基因轉染到骨髓間充質榦細胞中併可有效錶達具有生物活性的VEGF.(2)在成骨條件培養下,轉染hVEGF165基因後骨髓間充質榦細胞的成骨能力增彊.
목적:혈관내피세포생장인자재혈관재생화골조직재생과정중기착중요적조절작용.관찰hVEGF-165기인전염적토골수간충질간세포분비VEGF적공능급전염후세포적성골활성.방법:(1)체외분리、배양토골수간충질간세포,순화병감정토골수간충질간세포;면역형광법검측세포표면표지;전대배양후이1μgPcDNA3.1-hVEGF165∶3μL양리자지질체Lipofectamine적비례전염,통과ELISA화Western-blot검측전염후세포중외원성VEGF적표체.(2)측정재정상조건배양화성골조건배양하,전염후세포상청중감성린산매、골개소적수평.결과:(1)hVEGF165기인전염적골수간충질간세포능성공분비VEGF단백.(2)성골조건배양하,기인전염조세포감성린산매화골개소적분비량명현고우미전염조(P<0 05);이재정상조건배양하,기인전염조세포감성린산매화골개소적표체분비량교저.결론:(1)채용기인전염기술가장hVEGF165기인전염도골수간충질간세포중병가유효표체구유생물활성적VEGF.(2)재성골조건배양하,전염hVEGF165기인후골수간충질간세포적성골능력증강.
