畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2010年
12期
1523-1528
,共6页
李惠侠%罗肖%刘荣鑫%杨映娟%杨公社
李惠俠%囉肖%劉榮鑫%楊映娟%楊公社
리혜협%라초%류영흠%양영연%양공사
Wnt/β-catenin信号通路%LiCl%脂肪间充质干细胞%脂肪细胞%分化
Wnt/β-catenin信號通路%LiCl%脂肪間充質榦細胞%脂肪細胞%分化
Wnt/β-catenin신호통로%LiCl%지방간충질간세포%지방세포%분화
本研究以猪脂肪间充质干细胞(AMSCs)为材料,通过LiCl对AMSCs细胞中Wnt/β-catenin信号通路第二信使β-联蛋白(β-catenin)的稳定作用,探讨体外激活Wnt/β-catenin信号通路对猪AMSCs向脂肪细胞分化的作用及其初步机制.应用细胞免疫化学染色鉴定AMSCs细胞表面分子CD44和CD105的表达;油红O染色法检测AMSCs成脂分化潜能;采用半定量RT-PCR及Western blot等技术分析Wnt/β-catenin通路各因子及脂肪细胞分化转录因子的表达.结果显示,猪AMSCs表达CD44和CD105,并具有多向分化潜能;25 mmol·L-1的LiCl处理AMSCs后,细胞中β-catenin蛋白表达明显增强;激活Wnt/β-catenin信号通路后,猪AMSCs在成脂诱导剂作用下向脂肪细胞分化的数目减少、细胞内甘油三酯含量降低,脂肪细胞分化转录因子C/EBPα和PPARγ的表达受到抑制.以上结果表明,激活Wnt/β-catenin信号通路能明显抑制猪AMSCs向脂肪细胞分化,其抑制作用可能是通过下调脂肪细胞分化转录因子PPARγ和C/EBPα的表达来实现的.
本研究以豬脂肪間充質榦細胞(AMSCs)為材料,通過LiCl對AMSCs細胞中Wnt/β-catenin信號通路第二信使β-聯蛋白(β-catenin)的穩定作用,探討體外激活Wnt/β-catenin信號通路對豬AMSCs嚮脂肪細胞分化的作用及其初步機製.應用細胞免疫化學染色鑒定AMSCs細胞錶麵分子CD44和CD105的錶達;油紅O染色法檢測AMSCs成脂分化潛能;採用半定量RT-PCR及Western blot等技術分析Wnt/β-catenin通路各因子及脂肪細胞分化轉錄因子的錶達.結果顯示,豬AMSCs錶達CD44和CD105,併具有多嚮分化潛能;25 mmol·L-1的LiCl處理AMSCs後,細胞中β-catenin蛋白錶達明顯增彊;激活Wnt/β-catenin信號通路後,豬AMSCs在成脂誘導劑作用下嚮脂肪細胞分化的數目減少、細胞內甘油三酯含量降低,脂肪細胞分化轉錄因子C/EBPα和PPARγ的錶達受到抑製.以上結果錶明,激活Wnt/β-catenin信號通路能明顯抑製豬AMSCs嚮脂肪細胞分化,其抑製作用可能是通過下調脂肪細胞分化轉錄因子PPARγ和C/EBPα的錶達來實現的.
본연구이저지방간충질간세포(AMSCs)위재료,통과LiCl대AMSCs세포중Wnt/β-catenin신호통로제이신사β-련단백(β-catenin)적은정작용,탐토체외격활Wnt/β-catenin신호통로대저AMSCs향지방세포분화적작용급기초보궤제.응용세포면역화학염색감정AMSCs세포표면분자CD44화CD105적표체;유홍O염색법검측AMSCs성지분화잠능;채용반정량RT-PCR급Western blot등기술분석Wnt/β-catenin통로각인자급지방세포분화전록인자적표체.결과현시,저AMSCs표체CD44화CD105,병구유다향분화잠능;25 mmol·L-1적LiCl처리AMSCs후,세포중β-catenin단백표체명현증강;격활Wnt/β-catenin신호통로후,저AMSCs재성지유도제작용하향지방세포분화적수목감소、세포내감유삼지함량강저,지방세포분화전록인자C/EBPα화PPARγ적표체수도억제.이상결과표명,격활Wnt/β-catenin신호통로능명현억제저AMSCs향지방세포분화,기억제작용가능시통과하조지방세포분화전록인자PPARγ화C/EBPα적표체래실현적.
