基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2011年
1期
7-15
,共9页
豆豉%豆豉纤溶酶%铜绿假单胞菌%分离纯化%酶学性质
豆豉%豆豉纖溶酶%銅綠假單胞菌%分離純化%酶學性質
두시%두시섬용매%동록가단포균%분리순화%매학성질
从全国各地采集豆豉样品,经富集培养并利用纤维蛋白平板法获得一株形态与现存产纤溶酶微生物差异较大的菌株HS9.通过传统方法、化学方法以及16S rRNA序列分析对HS9进行分类鉴定,属于Pseudomonas aeruqinosa,是未见报道的产豆豉纤溶酶菌株.发酵培养HS9获得粗酶,经20%～70%硫酸铵梯度盐析、Sephadex G-75凝胶过滤以及CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析分离纯化后,得到了电泳纯酶.通过SDS-PAGE了解该酶分子量约为34 kD,pH 8.0～8.5时酶活性最高,最适作用温度48℃,作用方式为直接水解纤维蛋白,胃蛋白酶抑制剂在工作浓度1μmol/L时能完全抑制其活性,推测该酶为天冬氨酸蛋白酶,是一种新型的豆豉纤溶酶.
從全國各地採集豆豉樣品,經富集培養併利用纖維蛋白平闆法穫得一株形態與現存產纖溶酶微生物差異較大的菌株HS9.通過傳統方法、化學方法以及16S rRNA序列分析對HS9進行分類鑒定,屬于Pseudomonas aeruqinosa,是未見報道的產豆豉纖溶酶菌株.髮酵培養HS9穫得粗酶,經20%～70%硫痠銨梯度鹽析、Sephadex G-75凝膠過濾以及CM-Sepharose Fast Flow暘離子交換層析分離純化後,得到瞭電泳純酶.通過SDS-PAGE瞭解該酶分子量約為34 kD,pH 8.0～8.5時酶活性最高,最適作用溫度48℃,作用方式為直接水解纖維蛋白,胃蛋白酶抑製劑在工作濃度1μmol/L時能完全抑製其活性,推測該酶為天鼕氨痠蛋白酶,是一種新型的豆豉纖溶酶.
종전국각지채집두시양품,경부집배양병이용섬유단백평판법획득일주형태여현존산섬용매미생물차이교대적균주HS9.통과전통방법、화학방법이급16S rRNA서렬분석대HS9진행분류감정,속우Pseudomonas aeruqinosa,시미견보도적산두시섬용매균주.발효배양HS9획득조매,경20%～70%류산안제도염석、Sephadex G-75응효과려이급CM-Sepharose Fast Flow양리자교환층석분리순화후,득도료전영순매.통과SDS-PAGE료해해매분자량약위34 kD,pH 8.0～8.5시매활성최고,최괄작용온도48℃,작용방식위직접수해섬유단백,위단백매억제제재공작농도1μmol/L시능완전억제기활성,추측해매위천동안산단백매,시일충신형적두시섬용매.
