分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2009年
3期
451-455
,共5页
杜培粉%伍林涛%姚远颋%尹峰%阮颖%刘春林
杜培粉%伍林濤%姚遠颋%尹峰%阮穎%劉春林
두배분%오림도%요원정%윤봉%원영%류춘림
AtTPS03基因%RNA干扰%拟南芥转化
AtTPS03基因%RNA榦擾%擬南芥轉化
AtTPS03기인%RNA간우%의남개전화
本研究以拟南芥DNA为模板,将罗勒烯合成酶AtTPS03基因的一个目的片段克隆到T-载体上.对克隆片段测序后,进行Blast比对,结果目的片段的序列与GenBank上报道的序列同源性达到100%.根据RNA干扰的基本原理,将目的片段正反向连到干扰载体pFGC5941查尔酮内含子的两侧,经限制性酶切和PCR扩增检测,证明已成功构建了干扰载体P-2AT03.利用农杆菌介导的浸花法转化拟南芥.收获的种子在含草丁膦的培养基上筛选抗性苗,通过对抗性苗的PCR检测,已成功获得了12株转基因苗.这些转基因苗为进一步研究罗勒烯和罗勒烯合成酶的功能奠定了良好基础.
本研究以擬南芥DNA為模闆,將囉勒烯閤成酶AtTPS03基因的一箇目的片段剋隆到T-載體上.對剋隆片段測序後,進行Blast比對,結果目的片段的序列與GenBank上報道的序列同源性達到100%.根據RNA榦擾的基本原理,將目的片段正反嚮連到榦擾載體pFGC5941查爾酮內含子的兩側,經限製性酶切和PCR擴增檢測,證明已成功構建瞭榦擾載體P-2AT03.利用農桿菌介導的浸花法轉化擬南芥.收穫的種子在含草丁膦的培養基上篩選抗性苗,通過對抗性苗的PCR檢測,已成功穫得瞭12株轉基因苗.這些轉基因苗為進一步研究囉勒烯和囉勒烯閤成酶的功能奠定瞭良好基礎.
본연구이의남개DNA위모판,장라륵희합성매AtTPS03기인적일개목적편단극륭도T-재체상.대극륭편단측서후,진행Blast비대,결과목적편단적서렬여GenBank상보도적서렬동원성체도100%.근거RNA간우적기본원리,장목적편단정반향련도간우재체pFGC5941사이동내함자적량측,경한제성매절화PCR확증검측,증명이성공구건료간우재체P-2AT03.이용농간균개도적침화법전화의남개.수획적충자재함초정련적배양기상사선항성묘,통과대항성묘적PCR검측,이성공획득료12주전기인묘.저사전기인묘위진일보연구라륵희화라륵희합성매적공능전정료량호기출.
