西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2008年
6期
271-275
,共5页
β-琼脂糖酶ⅠDagA%信号肽%分子伴侣%分泌表达
β-瓊脂糖酶ⅠDagA%信號肽%分子伴侶%分泌錶達
β-경지당매ⅠDagA%신호태%분자반려%분비표체
通过PCR技术扩增出了873 bp的dagA及813bp的去除信号肽的dagA(▽)编码序列,dagA与NCBI公布的Pseudoalteromonas atlantica β-琼脂糖酶ⅠdagA序列一致性达到99.8%,dagA(▽) 一致性达到100%.构建pET21a-dagA和pET21a-dagA(▽)表达载体,分别转化BL21(DE3)、Origami B(DE3)、ER2566宿主菌,共表达分子伴侣DsbC和FkpA.采用SDS-PAGE分析了构建的多个大肠杆菌表达系统中β-琼脂糖酶ⅠDagA的表达量及表达方式,获得了重组DagA高分泌性表达菌株ER2566-pET21a-dagA(▽)-FkpA.
通過PCR技術擴增齣瞭873 bp的dagA及813bp的去除信號肽的dagA(▽)編碼序列,dagA與NCBI公佈的Pseudoalteromonas atlantica β-瓊脂糖酶ⅠdagA序列一緻性達到99.8%,dagA(▽) 一緻性達到100%.構建pET21a-dagA和pET21a-dagA(▽)錶達載體,分彆轉化BL21(DE3)、Origami B(DE3)、ER2566宿主菌,共錶達分子伴侶DsbC和FkpA.採用SDS-PAGE分析瞭構建的多箇大腸桿菌錶達繫統中β-瓊脂糖酶ⅠDagA的錶達量及錶達方式,穫得瞭重組DagA高分泌性錶達菌株ER2566-pET21a-dagA(▽)-FkpA.
통과PCR기술확증출료873 bp적dagA급813bp적거제신호태적dagA(▽)편마서렬,dagA여NCBI공포적Pseudoalteromonas atlantica β-경지당매ⅠdagA서렬일치성체도99.8%,dagA(▽) 일치성체도100%.구건pET21a-dagA화pET21a-dagA(▽)표체재체,분별전화BL21(DE3)、Origami B(DE3)、ER2566숙주균,공표체분자반려DsbC화FkpA.채용SDS-PAGE분석료구건적다개대장간균표체계통중β-경지당매ⅠDagA적표체량급표체방식,획득료중조DagA고분비성표체균주ER2566-pET21a-dagA(▽)-FkpA.
