热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2008年
10期
1030-1033,1040
,共5页
谭翰清%郭赐贶%谭海芳%陈华%程洁萍%林凤%孔秀珍%丁丽娜
譚翰清%郭賜貺%譚海芳%陳華%程潔萍%林鳳%孔秀珍%丁麗娜
담한청%곽사황%담해방%진화%정길평%림봉%공수진%정려나
人类杯状病毒%诺如病毒%实时荧光PCR%逆转录PCR
人類杯狀病毒%諾如病毒%實時熒光PCR%逆轉錄PCR
인류배상병독%낙여병독%실시형광PCR%역전록PCR
目的 建立诺如病毒遗传组I型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR快速、特异、灵敏的检测方法,为疾病预防控制提供可靠的依据.方法 根据GenBank诺如病毒遗传组Ⅰ型代表株保守序列设计特异引物对和TaqMan-MGB探针,建立一步法实时荧光RT-PCR快速检测反应体系,优化反应条件,评价反应体系的灵敏度、特异性、重复性.并与常规RT-PCR比较.结果 诺如病毒遗传组I型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR检测时限短.仅1 h就出结果 ,与轮状病毒、腺病毒、星状病毒、甲肝病毒、诺如病毒遗传组Ⅱ型无交叉反应,最低检出下限为100拷贝/反应.比常规RT-PCR灵敏100倍,5份浓度不同的诺如病毒遗传组Ⅰ型标本重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为0.39%～1.02%.结论 诺如病毒遗传组Ⅰ型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR快速、特异、灵敏、重复性好,可应用于突发公共卫生应急检测和诺如病毒遗传组Ⅰ型监测,提高快速检测能力.
目的 建立諾如病毒遺傳組I型TaqMan-MGB探針實時熒光RT-PCR快速、特異、靈敏的檢測方法,為疾病預防控製提供可靠的依據.方法 根據GenBank諾如病毒遺傳組Ⅰ型代錶株保守序列設計特異引物對和TaqMan-MGB探針,建立一步法實時熒光RT-PCR快速檢測反應體繫,優化反應條件,評價反應體繫的靈敏度、特異性、重複性.併與常規RT-PCR比較.結果 諾如病毒遺傳組I型TaqMan-MGB探針實時熒光RT-PCR檢測時限短.僅1 h就齣結果 ,與輪狀病毒、腺病毒、星狀病毒、甲肝病毒、諾如病毒遺傳組Ⅱ型無交扠反應,最低檢齣下限為100拷貝/反應.比常規RT-PCR靈敏100倍,5份濃度不同的諾如病毒遺傳組Ⅰ型標本重複檢測5次,平均Ct值變異繫數範圍為0.39%～1.02%.結論 諾如病毒遺傳組Ⅰ型TaqMan-MGB探針實時熒光RT-PCR快速、特異、靈敏、重複性好,可應用于突髮公共衛生應急檢測和諾如病毒遺傳組Ⅰ型鑑測,提高快速檢測能力.
목적 건립낙여병독유전조I형TaqMan-MGB탐침실시형광RT-PCR쾌속、특이、령민적검측방법,위질병예방공제제공가고적의거.방법 근거GenBank낙여병독유전조Ⅰ형대표주보수서렬설계특이인물대화TaqMan-MGB탐침,건립일보법실시형광RT-PCR쾌속검측반응체계,우화반응조건,평개반응체계적령민도、특이성、중복성.병여상규RT-PCR비교.결과 낙여병독유전조I형TaqMan-MGB탐침실시형광RT-PCR검측시한단.부1 h취출결과 ,여륜상병독、선병독、성상병독、갑간병독、낙여병독유전조Ⅱ형무교차반응,최저검출하한위100고패/반응.비상규RT-PCR령민100배,5빈농도불동적낙여병독유전조Ⅰ형표본중복검측5차,평균Ct치변이계수범위위0.39%～1.02%.결론 낙여병독유전조Ⅰ형TaqMan-MGB탐침실시형광RT-PCR쾌속、특이、령민、중복성호,가응용우돌발공공위생응급검측화낙여병독유전조Ⅰ형감측,제고쾌속검측능력.
