甘肃农业大学学报
甘肅農業大學學報
감숙농업대학학보
JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
5期
6-12
,共7页
孙海亮%曹瑞兵%陈溥言%魏威%潘华奇%刘磊
孫海亮%曹瑞兵%陳溥言%魏威%潘華奇%劉磊
손해량%조서병%진부언%위위%반화기%류뢰
PCV2%分离%鉴定%动物模型
PCV2%分離%鑒定%動物模型
PCV2%분리%감정%동물모형
应用PCR方法对江苏省东台市某猪场送检的一头无名高热病死猪的腹股沟淋巴结及肺脏病料进行检测.结果表明:该病料中存在PCV2;病料转染PK-15细胞,盲传3代后,IFA方法检测结果显示有明显的特异性荧光.利用设计的一对特异性引物对PCV2-DT株(东台分离株)全长基因进行扩增,测序结果显示所扩增基因为PCV2全长基因,大小为1767 bp,包括11个完整的开放阅读框(ORF).PCV2-DT分离株与其他20株PCV2分离株序列比较发现,核苷酸同源性都在95 %以上,并与欧美株处于同一分支.PCV2-DT Rep、Cap序列同国内分离的16株相比较,核苷酸序列同源性分别为97.5 %~100 %和94.2 %~99.9 %.氨基酸序列同源性分别为98.4 %~99.7 %和93.2 %~99.6 %.用PK-15细胞从病料中分离的细胞毒接种3头42日龄健康仔猪(血清学检测无PCV1、PPV、PRV等感染),于首次接毒后的第10天出现发热、咳嗽、水样腹泻等症状,食欲几乎废绝,出现了PMWS症状,初步建立了PMWS动物模型.
應用PCR方法對江囌省東檯市某豬場送檢的一頭無名高熱病死豬的腹股溝淋巴結及肺髒病料進行檢測.結果錶明:該病料中存在PCV2;病料轉染PK-15細胞,盲傳3代後,IFA方法檢測結果顯示有明顯的特異性熒光.利用設計的一對特異性引物對PCV2-DT株(東檯分離株)全長基因進行擴增,測序結果顯示所擴增基因為PCV2全長基因,大小為1767 bp,包括11箇完整的開放閱讀框(ORF).PCV2-DT分離株與其他20株PCV2分離株序列比較髮現,覈苷痠同源性都在95 %以上,併與歐美株處于同一分支.PCV2-DT Rep、Cap序列同國內分離的16株相比較,覈苷痠序列同源性分彆為97.5 %~100 %和94.2 %~99.9 %.氨基痠序列同源性分彆為98.4 %~99.7 %和93.2 %~99.6 %.用PK-15細胞從病料中分離的細胞毒接種3頭42日齡健康仔豬(血清學檢測無PCV1、PPV、PRV等感染),于首次接毒後的第10天齣現髮熱、咳嗽、水樣腹瀉等癥狀,食欲幾乎廢絕,齣現瞭PMWS癥狀,初步建立瞭PMWS動物模型.
응용PCR방법대강소성동태시모저장송검적일두무명고열병사저적복고구림파결급폐장병료진행검측.결과표명:해병료중존재PCV2;병료전염PK-15세포,맹전3대후,IFA방법검측결과현시유명현적특이성형광.이용설계적일대특이성인물대PCV2-DT주(동태분리주)전장기인진행확증,측서결과현시소확증기인위PCV2전장기인,대소위1767 bp,포괄11개완정적개방열독광(ORF).PCV2-DT분리주여기타20주PCV2분리주서렬비교발현,핵감산동원성도재95 %이상,병여구미주처우동일분지.PCV2-DT Rep、Cap서렬동국내분리적16주상비교,핵감산서렬동원성분별위97.5 %~100 %화94.2 %~99.9 %.안기산서렬동원성분별위98.4 %~99.7 %화93.2 %~99.6 %.용PK-15세포종병료중분리적세포독접충3두42일령건강자저(혈청학검측무PCV1、PPV、PRV등감염),우수차접독후적제10천출현발열、해수、수양복사등증상,식욕궤호폐절,출현료PMWS증상,초보건립료PMWS동물모형.