CAJ | 학술논문

目的:表达和纯化丙型肝炎病毒(HCV)-Core、NS3和NS4的His融合抗原H-C、H-NS3和H-NS4,并初步探讨其在抗体检测中的应用.方法:用重组基因工程技术,构建3种重组质粒C-pET-28a-c(+)、NS3-pET-28a-c(+)和NS4-pET-28a-c(+)以及相应的工程菌;质粒经双酶切、PCR和测序鉴定正确后,IPTG诱导抗原表达,从IPTG使用浓度、诱导温度与时间3个方面优化抗原表达条件;用NTA柱纯化抗原后,分别用单片段重组抗原和混合抗原以酶联免疫吸附试验(EUSA)检测100份HCV抗体阳性血清和40份健康人血清.结果:用单片段重组抗原和混合抗原检测的100份HCV抗体阳性血清中,H-C、H-NS3和H-NS4的抗体阳性率分别为91%、75%和52%,而H-C、H-NS3和H-NS4混合抗原的抗体检出率为100%;检测40份健康人血清,结果全部为阴性.结论:HCV不同编码区单片段His融合抗原具有不同的抗体检出率,但均低于混合抗原的阳性率:在开发
목적:표체화순화병형간염병독(HCV)-Core、NS3화NS4적His융합항원H-C、H-NS3화H-NS4,병초보탐토기재항체검측중적응용.방법:용중조기인공정기술,구건3충중조질립C-pET-28a-c(+)、NS3-pET-28a-c(+)화NS4-pET-28a-c(+)이급상응적공정균;질립경쌍매절、PCR화측서감정정학후,IPTG유도항원표체,종IPTG사용농도、유도온도여시간3개방면우화항원표체조건;용NTA주순화항원후,분별용단편단중조항원화혼합항원이매련면역흡부시험(EUSA)검측100빈HCV항체양성혈청화40빈건강인혈청.결과:용단편단중조항원화혼합항원검측적100빈HCV항체양성혈청중,H-C、H-NS3화H-NS4적항체양성솔분별위91%、75%화52%,이H-C、H-NS3화H-NS4혼합항원적항체검출솔위100%;검측40빈건강인혈청,결과전부위음성.결론:HCV불동편마구단편단His융합항원구유불동적항체검출솔,단균저우혼합항원적양성솔:재개발