水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2008年
4期
558-567
,共10页
曲宪成%崔严慧%周正峰%刘颖%金一春%胡萍华%薛婷君%王琼
麯憲成%崔嚴慧%週正峰%劉穎%金一春%鬍萍華%薛婷君%王瓊
곡헌성%최엄혜%주정봉%류영%금일춘%호평화%설정군%왕경
团头鲂%促性腺激素Iβ亚基%5′侧翼序列%启动子%表达载体
糰頭魴%促性腺激素Iβ亞基%5′側翼序列%啟動子%錶達載體
단두방%촉성선격소Iβ아기%5′측익서렬%계동자%표체재체
本研究利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Iβ(GtH Iβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体.序列分析结果显示:克隆得到的GtH Iβ亚基基因5′端侧翼序列长度为479bp,其中包括TATA盒、ARE、PRE、ERE、SF-1、Ptxl等可能对GtH Iβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点.利用PCR方法在基因组中扩增得到了3个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtH Iβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础.
本研究利用改進的錨定PCR方法剋隆瞭糰頭魴(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Iβ(GtH Iβ)亞基基因5′耑側翼序列,併在生物信息學方法分析的基礎上構建瞭熒光素酶質粒錶達載體.序列分析結果顯示:剋隆得到的GtH Iβ亞基基因5′耑側翼序列長度為479bp,其中包括TATA盒、ARE、PRE、ERE、SF-1、Ptxl等可能對GtH Iβ亞基基因轉錄調控起重要作用的功能轉錄因子結閤位點.利用PCR方法在基因組中擴增得到瞭3箇缺失片段,併同全長片段一起分彆連接至pGL3-Basic報告基因載體,成功構建瞭糰頭魴GtH Iβ亞基基因5′耑側翼序列的錶達載體,為進一步研究、分析其轉錄調控機製提供瞭基礎.
본연구이용개진적묘정PCR방법극륭료단두방(Megalobrama amblycephala)촉성선격소Iβ(GtH Iβ)아기기인5′단측익서렬,병재생물신식학방법분석적기출상구건료형광소매질립표체재체.서렬분석결과현시:극륭득도적GtH Iβ아기기인5′단측익서렬장도위479bp,기중포괄TATA합、ARE、PRE、ERE、SF-1、Ptxl등가능대GtH Iβ아기기인전록조공기중요작용적공능전록인자결합위점.이용PCR방법재기인조중확증득도료3개결실편단,병동전장편단일기분별련접지pGL3-Basic보고기인재체,성공구건료단두방GtH Iβ아기기인5′단측익서렬적표체재체,위진일보연구、분석기전록조공궤제제공료기출.
